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Invitrogen Qubit 检测使用靶标选择性染料,只有与 DNA 、 RNA 或蛋白质靶结合时才会发射荧光。它们比传统的紫外吸光法更准确。传统的紫外吸光法会因盐、溶剂、洗涤剂、蛋白至以及游离核苷酸等污染物的影响而过高估计样品浓度。荧光测量法也比紫外吸光法的灵敏度高很多,而 Qubit 荧光仪能够在显著降低的噪音下准确测量稀释的样品。
提示:对于高通量的定量分析,请考虑使用具有荧光功能的酶标仪。Thermo Scientific Fluoroskan 微孔板荧光计 和 Varioskan LUX 多功能酶标仪 与Quant-iT 测定 兼容,可定量分析与 Qubit 荧光计和测定试剂盒相同的分析物。有关产品比较信息,请参阅我们的 RNA/DNA 定量页面。
虽然 Qubit 检测取决于所测量的分析物,但其共性使其具有选择性、灵敏性及与 Qubit 4 或 Flex 荧光仪配合使用的易用性。
染料可选择性地结合 DNA 、 RNA 或蛋白质
与紫外吸光度和传统 Bradford 蛋白质检测相比更灵敏
染料只有与靶结合时才会发射荧光
最大程度减少降解 DNA 或 RNA 等污染物的影响
易于操作
简单的混合后读取形式
培养时间短
DNA 和 RNA 检测仅需 2 分钟,蛋白质检测仅需 10-15 分钟
为 Qubit 荧光仪而设计
为用于 Qubit 4 和 Qubit Flex 荧光仪而优化
Qubit 检测可用于双链和单链 DNA (dsDNA 及 ssDNA)、RNA 、microRNA 和蛋白质。Qubit DNA 和 RNA 检测提供不同的定量范围。HS(高灵敏度)检测可以定量最低浓度的分析物。 BR(宽范围)检测可以在更大的范围内定量。RNA XR(扩展范围)检测则是高丰度样品的理想选择。多样的检测范围支持更大浓度范围内的准确测量。如图所示,与紫外吸光法相比,Qubit HS 和 BR 检测可检出更低浓度的 分析物。
此外,使用 Qubit 系统的荧光定量可以区分同一样品中的 RNA 和 DNA ,而紫外吸收度法则通常无法做到。Qubit 平台提供的全面解决方案对检测、耗材和仪器进行联合优化,从而实现了最佳性能,让您对结果的可靠性充满信心。
Qubit dsDNA 检测提供两个定量范围(HS 和 BR)和两种形式(标准品和 1X),其都是下游应用和处理的重要因素。此外还还提供用于定量 ssDNA 和寡核苷酸的检测。
产品 | 初始样品浓度 | 定量范围 | 检测数 | 货号 |
高灵敏度 dsDNA 检测 | ||||
Qubit 1X dsDNA HS 检测试剂盒 | 0.005–120 ng/µL | 0.1–120 ng | 100 | |
500 | ||||
Qubit dsDNA HS 检测试剂盒 | 0.005–120 ng/µL | 0.1–120 ng | 100 | |
500 | ||||
Qubit 1X dsDNA HS 检测 λ 标准品 | — | — | 500 | |
宽范围 dsDNA 检测 | ||||
Qubit 1X dsDNA BR 检测试剂盒 | 0.2–4,000 ng/µL | 4–4,000 ng | 100 | |
500 | ||||
Qubit dsDNA BR 检测试剂盒 | 0.2–2,000 ng/µL | 4–2,000 ng | 100 | |
500 | ||||
Qubit 1X dsDNA BR 检测 λ 标准品 | — | — | 500 | |
ssDNA 检测 | ||||
Qubit ssDNA 检测试剂盒 | 0.01–240 ng/µL | 0.2–240 ng | 100 |
相对于 RNA 和 ssDNA,我们的 Qubit dsDNA 高灵敏度 (HS) 和宽范围 (BR) 检测对 dsDNA 具有高度选择性。高灵敏度分析专为低浓度 dsDNA 样品而设计,有助于节省珍贵样品。dsDNA HS 和 BR 检测可很好的兼容盐、游离核苷酸、RNA、溶剂、洗涤剂或蛋白质等常见污染物。
Qubit dsDNA HS 检测结果
Qubit 4(显示)或 Qubit Flex 荧光仪上的结果可以数字或图形方式显示。这些图像显示了我们设计用于低 DNA 浓度样本的高灵敏度 (HS) dsDNA 检测。
本测试中使用 Qubit dsDNA HS 和 BR 检测评估了 Qubit 4 和 Flex 荧光仪以及竞品仪器的准确度和精度。Qubit 4 和 Flex 仪器的百分比偏差和 CV 值均低于竞品,表现出更高的准确度和精度。
Qubit 1X dsDNA 检测以便捷的预混合形式提供,无需制备 Qubit 工作溶液。您只需在预混溶液中添加样本或标准品,然后进行培养,即可读取结果。这种形式提供了简化、快速的工作流程,同时减少了试剂盒中的试管数(以及所使用塑料的数量)。
Qubit 1X dsDNA HS 检测具有与标准 dsDNA HS 检测相同的动态范围和检测限,但其动态范围比标准 dsDNA BR 检测更高,可实现最高 4,000 ng/µL 的扩展范围。
在 Qubit 1X dsDNA HS(左)和 BR(右)检测的核心范围内进行测试时,测得的 dsDNA 数量与预期值相差小于 10 % ,即使同时存在等量的 RNA 。
A) Qubit 1X dsDNA HS 检测
B) Qubit 1X dsDNA BR 检测
Qubit 1X dsDNA HS (A) 和 BR (B) 检测的选择性
图中显示了与预期值相比的接种已知数量 DNA 和 RNA 的样品的定量结果。圆圈代表 10 μL DNA 加 190 μ L 不同浓度工作溶液的样品。方块代表 10 μL RNA 和 10 μL DNA 加 180 μ L 不同浓度工作溶液的样品。圆圈和方块距离很近,甚至在有些情况下几乎无法区分,表明这两种 dsDNA 检测受 RNA 的影响极小。
Qubit ssDNA 检测试剂盒设计用于定量长 ssDNA 或寡核苷酸。因其也可检测 dsDNA 和 RNA,请在检测前提纯 ssDNA。 但是,检测结果不受常见污染物的影响,如盐、短寡核苷酸(≤6 个碱基)、游离核苷酸、溶剂、洗涤剂或蛋白质。
有三种 Qubit RNA 检测可用于定量不同浓度范围的大 RNA,且有一种检测可用于定量小 RNA 分子 (microRNA)。有关测量 RNA 样品完整性和质量的其他检测方法,请参见下一节RNA IQ 检测。
产品 | 初始样品浓度 | 定量范围 | 检测数 | 货号 |
常规 RNA 检测 | ||||
Qubit RNA HS 检测试剂盒 | 0.2–200 ng/µL | 4–200 ng | 100 | |
500 | ||||
Qubit RNA BR 检测试剂盒 | 0.5–1,200 ng/µL | 10–1,200 ng | 100 | |
500 | ||||
Qubit RNA XR 检测试剂盒 | 5–20,000 ng/µL | 100–20,000 ng | 100 | |
500 | ||||
microRNA 检测 | ||||
Qubit microRNA 检测试剂盒 | 0.025–150 ng/µL | 0.5–150 ng | 100 | |
500 |
定量 RNA 时,您可以在初始样品浓度范围重叠的三种 Qubit RNA 检测试剂盒中进行选择,即 250 pg/μL - 10,000 ng/μL。相对于双链 DNA (dsDNA),这些试剂盒对于 RNA 具有高度选择性。与其他 RNA 检测不同,该检测不需要 DNA 酶也可准确测量,即使样品中存在 DNA。这些检测可完美兼容盐、游离核苷酸、溶剂、洗涤剂或蛋白质等常见污染物。
在这一灵敏度测试中,Qubit RNA 和 microRNA 检测(红色和蓝色条)与靶 RNA (红色和蓝色线)的实际浓度非常接近。
Invitrogen Qubit microRNA 检测试剂盒设计用于对 microRNA 等小 RNA(17–25 nt 或 bp)轻松、精确地定量,即使存在盐、游离核苷酸、溶剂、洗涤剂或蛋白质等常规污染物等也可完成测定。相对于 rRNA或较大的信使 RNA (mRNA ) (>1,000 bp),该检测对于 小RNA 具有高度选择性。
提纯样品中的小 RNA 可在检测管中低至 0.5 ng 的水平下可重复定量。该检测可检测所有类型的小 RNA 、包括 microRNA 和短干扰 RNA (siRNA),且单链和双链均可。因其不检测核苷酸,所以也可区分小 mRNA 颗粒与完全降解的 RNA 。
Qubit RNA IQ 检测的开发是为了快速评价 RNA 样本的完整性和质量 (IQ)。它使用两种染料:一种结合较大的完整和/或结构化 RNA,而另一种结合较小的降解 RNA。此检测无需特殊处理、繁琐的样本制备或等待结果。
Qubit 蛋白质检测试剂盒让蛋白质的定量更加轻松、准确。这两种试剂盒拥有重叠的浓度范围,可在 12.5μg/mL 到 20 mg/mL 的初始样品浓度内保持准确,且结果对不同的蛋白质来说变异较小。Qubit 蛋白质检测易于操作,仅需 10-15 分钟的室温培养,无需长时间培养或暴露于高温下。
Qubit 内毒素检测测定旨在与 Qubit Flex 荧光计结合使用,可进行高效的荧光终点测定,以定量蛋白质、多肽、抗体或核酸样品等多种样品类型中的内毒素。可以使用不同的样品量进此测定,通过简化的工作流程实现 0.01-10.0 EU/mL 的动态范围。Qubit 内毒素检测测定试剂盒的主要特点和优势包括:
Invitrogen Qubit 系统验证试剂盒是一款快速、易用、基于试剂的检测,可检测 Qubit 4 和 Qubit Flex 荧光仪的性能。其三个组分包括一个空白试剂溶液、一种绿色荧光试剂和一种远红外荧光试剂。绿色荧光试剂在荧光仪上专门检测蓝色激发光(470 nm LED;430-495 nm 激发滤光片)和绿色荧光(510-580 nm 发射滤光片),而远红外荧光试剂则专门检测红色激发光(635 nm LED;600-645 nm 激发滤光片)和远红外荧光(665-720 nm 发射滤光片)。
自定义MyQubit 检测允许您在几分钟内为 Qubit 荧光仪创建更多的检测项目。任何在光谱上与 Qubit 硬件兼容的试剂或检测均可用于 Invitrogen Qubit 荧光仪。此外也提供几种预先配置的 MyQubit 检测供您下载。
MyQubit 检测是可自定义的桌面型荧光检测平台,可满足多种定量检测需求,包括实验室研究、质控、工艺监测及更多应用。您只需简单地下载 .qbt 文件并使用 USB 驱动器传输,即可为 Qubit 3.0 和 4 型荧光仪中添加新检测。
我们开发的各类自定义 MyQubit 检测中,包括适用于多种使用 Amplex Red 试剂的常用定量分析物的新 MyQubit 检测。在您使用 USB 驱动器将检测的 .qbt 文件传输至 Qubit 荧光仪后,即可与出厂预置的 Qubit 检测一同供您选择,从而扩展了 Qubit 荧光仪的功能。
检测 | 下载 Qubit 3.0 和 4 | 下载 Qubit 2.0* | PDF 手册 |
Amplex Red 胆固醇检测 | |||
Amplex Red 半乳糖检测 | |||
Amplex 葡萄糖检测 | |||
Amplex Red 谷氨酸检测 | |||
Amplex Red 过氧化氢检测 | |||
Amplex Red 蔗糖检测 |
* Qubit 2.0 荧光仪需要 2 GB 或更少的 USB 驱动器(如仪器随附的驱动器)才能传输 MyQubit 文件。
若要下载 .qbt 文件,请点击表格中所需的 .qbt 文件链接。 它将自动下载到您的计算机。确保您点击了对应于您的 Qubit 型号的正确链接。有关将 .qbt 文件上传至 Qubit 荧光仪的说明,请参阅检测的 PDF 手册。
下一代测序 (NGS) 的 Ion Torrent 方法中,会在模板制备过程中于一个 Ion Sphere 微粒 (ISP) 上创建各扩增子的多份拷贝。测序 DNA 或 RNA 之前,必须获知阳性模板 ISP 的数量。
在 Ion Personal Genome Machine (PGM) 或 Ion GeneStudio 系统上运行 NGS 前,可在 Qubit 荧光仪上使用 Ion Sphere 质控试剂盒对富集的 ISP 快速简单评估。 所有 ISP 都会与绿色荧光染料 Invitrogen Alexa Fluor 488 标记的互补寡核苷酸结合,而只有阳性模板的磁珠会与红色荧光染料 Invitrogen Alexa Fluor 647 标记的互补寡核苷酸结合。
产品 | 检测数 | 货号 |
Ion Sphere 质控试剂盒 (仅限 Qubit 4) | 20 |
Qubit 荧光仪可检测各染料共轭体的荧光发射,并使用 Excel 文件模板而根据 Alexa Fluor 647 染料与 Alexa Fluor 488 染料信号的比例来计算阳性模板 ISP 的百分比。这一使用 Qubit 荧光仪的质控步骤有助于判断成功进行测序的可能性,从而最终节省后续测序的时间和费用。
仅供科研使用。不可用于诊断程序。