采用活性染料对活细胞染色并在固定后依然可以保持染色图案，对于细胞内免疫分型至关重要。 从数据中排除死细胞将会实现细胞群更为准确的分离与鉴定。 Invitrogen Molecular Probes LIVE/DEAD 可固定死细胞染色剂是一种有助于确认在固定或通透处理后可对细胞活性进行准确评估的可固定活性染料。
这些基于流式细胞术的试剂盒具有如下优势：
- 灵活—三种包装规格，八个单通道荧光色，涵盖 UV、405、488、532、561 及 633nm 激光，灵活满足实验的需求
- 特异—活细胞和死细胞可被清晰的区分，即便是在固定后也可轻松排除影响结果准确性的死细胞
- 简便性—几乎兼容所有染色及免疫分型方案
LIVE/DEAD 可固定死细胞染色剂
LIVE/DEAD 可固定死细胞染色试剂盒基于荧光反应染料与细胞蛋白（胺）的反应。 这些染料不能穿透活细胞膜，所以仅有细胞表面的蛋白可与染料发生反应，产生微弱染色（图1，活细胞）。 这些反应染料可穿透受损的死细胞细胞膜并对内部和外部的胺进行染色，从而实现更明亮的染色（图1，死细胞）
图1： LIVE/DEAD 可固定死细胞染色原理。 非细胞通透的胺反应染料仅能结合到活细胞的表面，产生非常微弱的荧光。 这些染料可穿透死细胞的细胞膜并与内部的蛋白发生结合，从而产生极强的荧光。
活细胞和死细胞群之间的荧光强度差异通常在50倍以上，因此两者之间可实现完全区分（图 2A）。 此外，染料与之间的共价结合方式使得在通过福尔马林固定（常用于细胞内的免疫分型以及病原体失活）后依然可以保留活细胞和死细胞群之间的差异（图2B）。
图 2. 固定后 LIVE/DEAD 可固定死细胞染色保留。LIVE/DEAD 可固定 Aqua 死细胞染色试剂盒用于对活细胞（左侧峰）和热处理 Jurkat 细胞（右侧峰）的混合物进行差异染色。 (A) 中的细胞没有固定；(B)中的细胞在 3.7% 福尔马林中固定后进行染色。 在流式细胞仪上采用 405nm 激发波长及 ~525nm 散射波长分析样品。
| LIVE/DEAD Fixable Blue 染色剂 | LIVE/DEAD Fixable Violet 染色剂 | LIVE/DEAD Fixable Aqua 染色剂 | LIVE/DEAD Fixable Yellow 染色剂 | ||
|---|---|---|---|---|---|
| 测定基础 | LIVE/DEAD可固定细胞死活染色试剂盒是灵活的细胞活性检测染料，可根据细胞膜完整性以及与胺基发生反应来区分活细胞和死细胞。 细胞可被固定以便进行细胞内抗原检测，而不会出现传统细胞染色方法产生的细胞损失。 并可根据流式细胞术结果轻松排除死亡细胞。 | ||||
| 读取 | 死细胞发出强烈的荧光，而活细胞的荧光强度极低，两者易于区分。 | ||||
| 激光(nm) | UV | 405 | 405 | 405 | |
| Ex/Em (nm) | 350/450 | 416/451 | 367/526 | 400/575 | |
| 参考文献 |
引用文献
| ||||
| 多重 |
是
|
是
|
是
|
是
| |
| 染料相容性 | 不可与Indo-1（蓝色）、DAPI或Hoechst 33342等Invitrogen产品系列一起使用 | 不可与 Pacific Blue 染料、CellTrace Violet 染色剂、FxCycle Violet 染色剂、BV421 或 eFluor 450 等 Invitrogen 产品系列一起使用 | 不可与Pacific Green染料、F2N12S凋亡检测试剂盒、AmCyan或BV510等Invitrogen产品系列一起使用 | 不可与Pacific Orange染料、Qdot 605、F2N12S凋亡检测试剂盒或BV605等Invitrogen产品系列一起使用 | |
| 可固定 |
是
|
是
|
是
|
是
| |
| 样品类型 |
活细胞
| ||||
| 货 号 | 80 个反应 | ||||
| 200 个反应 | |||||
| 400 个反应 | |||||
| LIVE/DEAD 可固定细胞死活绿色染色剂 | LIVE/DEAD 可固定细胞死活红色染色剂 | |||
|---|---|---|---|---|
| 测定基础 | LIVE/DEAD可固定细胞死活染色试剂盒是灵活的细胞活性检测染料，可根据细胞膜完整性以及与胺基发生反应来区分活细胞和死细胞。 细胞可被固定以便进行细胞内抗原检测，而不会出现传统细胞染色方法产生的细胞损失。 并可根据流式细胞术结果轻松排除死亡细胞。 | |||
| 读取 | 死细胞发出强烈的荧光，而活细胞的荧光强度极低，两者易于区分。 | |||
| 激光(nm) | 488 | 488 | 561 | |
| Ex/Em (nm) | 495/520 | 595/615 | ||
| 参考文献 |
引用文献
| |||
| 多重 |
是
|
是
| ||
| 染料相容性 | 不可与FITC、Alexa Fluor 488、GFP或CellTrace CSFE染色剂等I产品一起使用 | 不可与R-PE、碘化丙啶、SYTOX AADvanced染色剂、7-AAD、PE-Alexa Fluor 610和PE-Texas Red串联染料等产品一起使用 | ||
| 可固定 |
是
|
是
| ||
| 样品类型 |
活细胞
| |||
| 货 号 | 80 个反应 | |||
| 200 个反应 | ||||
| 400 个反应 | ||||
| LIVE/DEAD 可固定细胞死活远红外染色剂 | LIVE/DEAD 可固定细胞死活近红外染色剂 | ||
|---|---|---|---|
| 测定基础 | LIVE/DEAD可固定细胞死活染色试剂盒是灵活的细胞活性检测染料，可根据细胞膜完整性以及与胺基发生反应来区分活细胞和死细胞。 细胞可被固定以便进行细胞内抗原检测，而不会出现传统细胞染色方法产生的细胞损失。 并可根据流式细胞术结果轻松排除死亡细胞。 | ||
| 读取 | 死细胞发出强烈的荧光，而活细胞的荧光强度极低，两者易于区分。 | ||
| 激光(nm) | 633/635 | 633/635 | |
| Ex/Em (nm) | 650/665 | 750/775 | |
| 参考文献 |
引用文献
| ||
| 多重 |
是
|
是
| |
| 染料相容性 | 不可与APC、 Alexa Fluor 647 染料、FxCycle Far Red 和 CellTrace Far Red 染色剂等产品一起使用 | 不可与APC-Alexa Fluor 750、APC-Cy7 或 Vybrant DyeCycle Ruby 染色剂等 产品一起使用 | |
| 可固定 |
是
|
是
| |
| 样品类型 |
活细胞
| ||
| 货 号 | 80 个反应 | L34973 | L34975 |
| 200 个反应 | L10120 | L10119 | |
| 400 个反应 | L34974 | L34976 | |
| LIVE/DEAD Fixable Blue 染色剂 | LIVE/DEAD Fixable Violet 染色剂 | LIVE/DEAD Fixable Aqua 染色剂 | LIVE/DEAD Fixable Yellow 染色剂 | ||
|---|---|---|---|---|---|
| 测定基础 | LIVE/DEAD可固定细胞死活染色试剂盒是灵活的细胞活性检测染料，可根据细胞膜完整性以及与胺基发生反应来区分活细胞和死细胞。 细胞可被固定以便进行细胞内抗原检测，而不会出现传统细胞染色方法产生的细胞损失。 并可根据流式细胞术结果轻松排除死亡细胞。 | ||||
| 读取 | 死细胞发出强烈的荧光，而活细胞的荧光强度极低，两者易于区分。 | ||||
| 激光(nm) | UV | 405 | 405 | 405 | |
| Ex/Em (nm) | 350/450 | 416/451 | 367/526 | 400/575 | |
| 参考文献 |
引用文献
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| 多重 |
是
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是
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是
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是
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| 染料相容性 | 不可与Indo-1（蓝色）、DAPI或Hoechst 33342等Invitrogen产品系列一起使用 | 不可与 Pacific Blue 染料、CellTrace Violet 染色剂、FxCycle Violet 染色剂、BV421 或 eFluor 450 等 Invitrogen 产品系列一起使用 | 不可与Pacific Green染料、F2N12S凋亡检测试剂盒、AmCyan或BV510等Invitrogen产品系列一起使用 | 不可与Pacific Orange染料、Qdot 605、F2N12S凋亡检测试剂盒或BV605等Invitrogen产品系列一起使用 | |
| 可固定 |
是
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是
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是
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| 样品类型 |
活细胞
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| 货 号 | 80 个反应 | ||||
| 200 个反应 | |||||
| 400 个反应 | |||||
| LIVE/DEAD 可固定细胞死活绿色染色剂 | LIVE/DEAD 可固定细胞死活红色染色剂 | |||
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| 测定基础 | LIVE/DEAD可固定细胞死活染色试剂盒是灵活的细胞活性检测染料，可根据细胞膜完整性以及与胺基发生反应来区分活细胞和死细胞。 细胞可被固定以便进行细胞内抗原检测，而不会出现传统细胞染色方法产生的细胞损失。 并可根据流式细胞术结果轻松排除死亡细胞。 | |||
| 读取 | 死细胞发出强烈的荧光，而活细胞的荧光强度极低，两者易于区分。 | |||
| 激光(nm) | 488 | 488 | 561 | |
| Ex/Em (nm) | 495/520 | 595/615 | ||
| 参考文献 |
引用文献
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| 多重 |
是
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| 染料相容性 | 不可与FITC、Alexa Fluor 488、GFP或CellTrace CSFE染色剂等I产品一起使用 | 不可与R-PE、碘化丙啶、SYTOX AADvanced染色剂、7-AAD、PE-Alexa Fluor 610和PE-Texas Red串联染料等产品一起使用 | ||
| 可固定 |
是
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是
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| 样品类型 |
活细胞
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| 货 号 | 80 个反应 | |||
| 200 个反应 | ||||
| 400 个反应 | ||||
| LIVE/DEAD 可固定细胞死活远红外染色剂 | LIVE/DEAD 可固定细胞死活近红外染色剂 | ||
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| 测定基础 | LIVE/DEAD可固定细胞死活染色试剂盒是灵活的细胞活性检测染料，可根据细胞膜完整性以及与胺基发生反应来区分活细胞和死细胞。 细胞可被固定以便进行细胞内抗原检测，而不会出现传统细胞染色方法产生的细胞损失。 并可根据流式细胞术结果轻松排除死亡细胞。 | ||
| 读取 | 死细胞发出强烈的荧光，而活细胞的荧光强度极低，两者易于区分。 | ||
| 激光(nm) | 633/635 | 633/635 | |
| Ex/Em (nm) | 650/665 | 750/775 | |
| 参考文献 |
引用文献
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| 多重 |
是
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是
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| 染料相容性 | 不可与APC、 Alexa Fluor 647 染料、FxCycle Far Red 和 CellTrace Far Red 染色剂等产品一起使用 | 不可与APC-Alexa Fluor 750、APC-Cy7 或 Vybrant DyeCycle Ruby 染色剂等 产品一起使用 | |
| 可固定 |
是
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是
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| 样品类型 |
活细胞
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| 货 号 | 80 个反应 | L34973 | L34975 |
| 200 个反应 | L10120 | L10119 | |
| 400 个反应 | L34974 | L34976 | |
LIVE/DEAD 可固定死细胞染料试用装
不确定哪种染料更适合于您的实验，或者您的实验还需要更多的灵活性？ 试试我们的 LIVE/DEAD 可固定死细胞染料试用装，其中含有足够每种颜色染料 40 个反应的量。
LIVE/DEAD 可固定死细胞染色剂补偿
在使用任何 LIVE/DEAD 可固定死细胞染色试剂盒或任何胺反应染料时，Invitrogen ArC 胺反应补偿微球试剂盒均可提供一致、准确并且便于使用的技术用于流式细胞仪的补偿设置。 这些试剂盒的优点包括：
- 无需对细胞进行热处理
- 针对 LIVE/DEAD 可固定死细胞染色试剂盒优化
- 快速而简单的微球式流失细胞补偿
- 无需稀少珍贵的样品用于补偿设置
- 准确并一致的结果
来自于 Arc 微珠试剂盒的微球通过 LIVE/DEAD 可固定 Violet 死细胞染色试剂盒（V34955）进行染色并经流式细胞仪分析。 ArC 微球试剂盒（A 10346）中的阳性及阴性微珠混合物通过 LIVE/DEAD 可固定Violet死细胞染色试剂盒（V34955）进行染色，洗涤后，通过装备有 405/7 nm 激光以及 450/50 带通滤波器的流式细胞仪进行分析。 直方图结果表明阳性以及阴性的峰可以实现清晰的区分。
资源
流式胞内染色示意小视频—细胞因子和核内靶点检测
流式细胞术学习中心—获取流式细胞术学习资源，以轻松计划、顺利开展流式实验。
Panel Builder流式配色工具—这款简单、定制化的在线工具可助您轻松解决多色流式实验的配色难题。
5步法实验资源
不可转售。Super Bright聚合物染料由Becton, Dickinson and Company授权销售。
仅供科研使用，不可用于诊断目的。