使用RNAlater产品溶液让时间静止
RNAlater溶液是一种水溶性、无毒性组织储存试剂,其可迅速渗透到组织内以稳定和保护细胞的RNA。 使用RNAlater溶液便不再需要立即处理组织样本,亦无须将样本在液氮中冷冻待随后处理。 收集组织块并浸没于RNAlater溶液中保存,这样就不会破坏后续RNA提取过程中获得的RNA的品质和数量。
- 即时核糖核酸酶灭活
- 无须液氮和冷冻保存
- 最大限度地减少冻结和研磨
- 完美进行实地收集
- 灵活的组织存储
- 与大多数RNA分离操作(包括所有的AmbionRNA分离试剂盒)兼容
产品选择指南
功能 | 产品 | 描述 |
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RNAlater高稳定性产品 | RNAlater组织收集: RNA稳定性解决方案 | 水溶性、无毒性组织储存试剂,可迅速渗透到组织内以稳定和保护未冷冻组织样本中RNA的完整性,亦无须立即处理组织样本或将其冷冻于液氮中。 |
RNAlater-ICE冻存组织转染溶液 | 防止组织冷冻过程中出现RNA降解,尽可能避免费力地研磨冷冻组织,保护RNA |
将组织切成任一方向小于0.5 cm的薄片,并浸没于约5体积的RNAlater溶液中 (如0.5 g样本需要约2.5 mL的RNAlater溶液)。 小的器官如大鼠肾、肝以及脾可整个保存在RNAlater溶液中。 在少量PBS中重悬细胞沉淀,然后加入5–10体积的RNAlater溶液。 样品在4°C下可保存1个月,25°C下可保存一周,在-20°C下可无限期保存。 记录在–20°C下用RNAlater溶液处理的组织。
用于RNA提取时,只需将组织从RNAlater溶液中取出,即可按刚收集的组织进行处理。 大多数组织可在裂解缓冲液中直接匀浆处理,但较硬的组织 (如骨骼) 则需要在液氮中冷冻保存并研磨。
RNA的的解决方案是否兼容我的系统?
RNAlater溶液已经过各种哺乳动物组织、植物、大肠杆菌、非洲爪蟾、鱼和果蝇测试。 它已成功应用于我们所有的Ambion RNA分离试剂盒 (图1),包括RNAqueous、ToTALLY RNA™、RNA WIZ和Poly(A)Purist™试剂盒及TRI Reagent产品 (MRC)。 其它商品化RNA分离试剂盒和标准RNA分离实验方案亦可与RNAlater溶液配合使用。
![]() | 图 1. RNAlater溶液可适用于各种RNA提取方法。 将新鲜切片的小鼠整个肝脏和心脏放入RNAlater溶液中,置于4°C下保存三天。 采用Ambion的ToTALLY™ RNA、RNAqueous™或Poly(A)Purist™试剂盒从同等质量的不同组织中提取RNA。 |
later解决方案是否用于维持组织中的组织学?
Huntsman癌症研究所的Scott Florell和Sancy Leachman博士近期的研究 [Mod Pathol 14:116 (2001)] 显示,RNAlater溶液确实能够保持组织的组织学特征。 在一项盲法研究中,两位病理学家比较了立即进行组织学处理 (福尔马林固定石蜡包埋) 与采用RNAlater溶液保存、冲洗后进行组织学处理的人组织切片。 其结果表示两组样本的形态学特点和染色特性相同。 其研究结果示例请见图2。 RNAlater溶液除可提供极佳的染色性能并保护形态学信息外,许多免疫组化染料亦可在采用该溶液保存的样本中获得出色的性能,说明采用RNAlater溶液保存样本不会损伤细胞表位。
图2. RNAlater保存的组织的结构。
RNAlater保存的样本适用于组织学,并可提供极佳的形态学详情 在检查标准的组织学标准时,RNAlater-保存的材料切片与未处理样本切片无差异。 (A). H&E染色的人皮肤冷冻切片置于RNAlater溶液中保存一周然后处理。 (B). 采用上述方法染色并以福尔马林固定石蜡包埋的人皮肤冷冻切片置于RNAlater溶液中保存一周然后处理。
RNAlater解决方案的实际效果如何?
这款方便且价格低廉的产品可以保持您的珍贵RNA的完整性,无需研磨液氮中冻存的组织,节省了您的时间和精力。 RNAlater 溶液经济实惠,并且可于室温储存。
RNAlater 解决方案的技术资料
技术说明文章
- 在RNAlater中长期保存时,RNA依然稳定-见技术说明12(4): 组织样品存储于RNAlater或者速冻后保存于-80°C…… 2.5年以后的RNA如何进行比较?
- RNAlater常见问题 - 如何保存未分离的RNA
- RNA和蛋白稳定液RNAlater
- 用RNAlater使时间静止-技术说明10(1): Ambion RNAlater 组织收集: 采用RNA稳定溶液,研究人员可以在组织采集后,将提取RNA的时间推迟几天、几周甚至几年,且不会影响RNA的完整性。
- RNA分离之前在组织中保存RNA - 技术说明8(2): RNAlater方法可以将RNA保存于组织中用于组织学试验。
- RNAlater 用于RNA和蛋白质稳定-技术说明 11(3): 可从RNAlater溶液中回收完整的蛋白质——适用于下游应用领域 (如蛋白质印迹或二维凝胶分析) 的稳定化的样本。
- RNAlater保留阵列分析的细菌基因表达概况 - 技术说明9(5): 样品处理中引人注目的基因表达模式
- 全球RNAlater解决方案: 稳定表达蛋白谱 - 技术须知14(2): 下面将介绍三个不同的研究小组如何使用RNAlater溶液保护样本用于芯片和RT-PCR研究的。
- 解冻冷冻组织而不损伤RNA-技术要点10(2): RNAlater-ICE是一种独特的RNA稳定溶液——只需将冷冻组织放入RNAlater-ICE即可自动操作! 组织解冻无RNA降解的危险。 一旦解冻,这些组织就可以像新鲜组织一样处理。
方案和用户手册
补充方案
海报
- RNAlater可以保存细菌基因表达谱用于检测分析
我们在此展示,RNAlater溶液可迅速稳定革兰阳性和革兰阴性种属的RNA表达图谱。 采用及不采用RNAlater溶液处理,从细菌中分离RNA,在Agilent 2100生物分析仪上,利用基于膜过滤的芯片分析评估RNA的完整性。