细胞表面受体与其特异性抗体结合时，可诱导发生受体介导的内吞作用。它们通常被作为靶向传递治疗用药物、毒素、酶或DNA的载体进行研究。
我们可提供多种抗体标记染料，用于基于洗涤或淬灭的检测，对抗体内化进行检测。
用于监测抗体内化的pHrodo 技术
一些荧光强度不受环境影响的荧光基团（如Invitrogen Alexa Fluor染料），用于抗体内化研究时需要使用淬灭剂。而pHrodo iFL 染料在中性pH条件下不发出荧光，内化后在酸性pH环境下可发出明亮的荧光，且无需使用淬灭剂（如图），是一类便捷高效的抗体内化检测工具。
pHrodo iFL 系列和pHrodo深红色染料在中性pH下几乎不发出荧光，随着染料被内化且pH降低，远红、红色或绿色荧光信号会逐渐增强，而荧光信号的增强可用于检测胞吞途径的过程。区别于pHrodo iFL 绿色和红色染料，pHrodo深红染料的pKa更低，直到晚期内化阶段才会发出荧光。
低 pKa 的 pHrodo Deep Red 经过优化，用于晚期内体和溶酶体检测。使用 pHrodo Deep Red 标记赫赛汀（用于治疗乳腺癌和胃癌的单克隆抗体）。使用由 pHrodo Deep Red 标记的赫赛汀和 CellLight 早期内体-RFP（左）、CellLight 晚期内体-RFP（中）和 CellLight 溶酶体-RFP（右）处理 SKBR3 细胞。过夜孵育后，在 37℃ 下使用 NucBlue Live 核染料将样本染色 30 分钟。使用 EVOS M7000 细胞成像系统获得荧光图像并叠加。重叠的荧光信号（白色）表明，用 pHrodo Deep Red（洋红色）标记的内化赫赛汀抗体在晚期内体和溶酶体中发出荧光，但在早期内体中不发出荧光。这些数据表明，晚期内体和溶酶体中的酸性 pH（5.5–6.0）环境，可以激活 pHrodo Deep Red 从无荧光变为深红色荧光。
适用于抗体内化研究的染料选择指南
| pHrodo Green iFL | pHrodo Red iFL | pHrodo Deep Red | |
|---|---|---|---|
| 检测范围 | 早期内体到溶酶体 | 晚期内体和溶酶体 | |
| 常用滤光片组 | FITC/GFP | TRITC/RFP | Cy5 |
| 激发/发射波长 (nm) | 509/533 | 560/585 | 640/655 |
| 信噪比 |  |  |  |
| 光稳定性 | | | |
| 亮度 | | | |
| pKa* | 6.5 | 6.5 | 5 |
| 多色标记 | 是 | ||
| 活细胞 | 是 | ||
| 固定细胞 | 否 | ||
| 检测平台 | 成像系统、高内涵分析、流式细胞仪 | ||
| Zenon Fab 片段 | Z25609 (小鼠) Z25611 (人) Z25613 (人，5x包装) | Z25610 (小鼠) Z25612 (人) Z25614 (人，5x包装) | Z25622（小鼠） Z25618 （人） |
| SiteClick 位点特异性 | - | C20034 | S10914 |
| 胺反应性标记试剂盒 | P36015 | P36014 | P35355 |
| 胺反应性试剂 | P36013 | P36011 | P35359 |
*信号出现在环境 pH 达到 pKa 之前。
pHrodo iFL抗体标记方法
pHrodo iFL Green和pHrodo iFL Red活性染料是在pHrodo染料（用于吞噬、内吞、和内化过程的指示剂）基础上进行升级改进而来的。pHrodo iFL染料的溶解性进行了优化，提高了与标记抗体的结合，避免可能会在结合过程中发生沉淀。荧光染料可采用三种不同的抗体标记技术进行了标记结合，以满足您检测抗体内化的需要。
位点特异性的SiteClick抗体标记技术
SiteClick抗体标记系统可以简单且位点特异地将化合物（包括荧光染料或毒素等）连接至几乎所有IgG抗体只有在重链才存在的N端多糖位置，远离抗原结合结构域，实现每一次标记之间和不同抗体之间（无论哪种构型和宿主种属）的出色可重复性。抗体可以通过在糖残基上插入叠氮基团进行酶修饰，而使其可以发生点击化学反应，然后与一系列Click-iT sDIBO Alkynes（可标有Alexa Fluor染料、生物素或其他所需连接分子的活性形式）通过Click化学反应进行标记物连接。
适用于快速筛选的Zenon pHrodo iFL抗体标记技术
Zenon抗体标记产品提供了一种非常快速（约十分钟内）标记IgG抗体的方法，从而成为抗体内化筛选的一种非常高效有用的工具。Zenon标记方法采用了与pH敏感的pHrodo iFL染料或经典的Alexa Fluor染料偶联结合的Fab片段。这些Fab片段可直接结合至IgG抗体的Fc区，且不影响目标抗体的抗原识别位点，同时也具有很好可靠的标记恒定度。Zenon技术可标记低至1 μg 的抗体，与传统的使用氨基或巯基反应性标记方法不同，Zenon抗体标记可兼容BSA以及其他的稳定蛋白。
经典pHrodo氨基反应性染料和染料标记试剂盒
pHrodo iFL染料可通过抗体上的赖氨酸用于传统的抗体标记。这些氨基反应性的pHrodo iFL STP酯具有绿色和红色两种版本，可作为单独包装或微量蛋白标记试剂盒提供，后者包含标记及纯化蛋白或抗体所需的全部试剂。
用于抗体内化研究的抗体标记试剂
| 产品名称 | 标记规格 | SKU |
|---|---|---|
| SiteClick Antibody 叠氮修饰试剂盒（单独订购时不包含 sDIBO 标签） | 100mg | S20026 |
| Click-iT pHrodo iFL Red sDIBO 炔烃，用于抗体标记 | 100mg | C20034 |
| SiteClick pHrodo Deep Red sDIBO 炔烃 | 250 μg | S10914 |
| SiteClick pHrodo Deep Red sDIBO 炔烃 | 1 mg | S10915 |
| SiteClick pHrodo iFL Red sDIBO 炔烃 | 1 mg | S10903 |
| SiteClick pHrodo iFL Red sDIBO 炔烃 | 5 mg | S10908 |
| 产品名称 | 标记规格 | SKU |
|---|---|---|
| Zenon pHrodo iFL Green Mouse IgG 标记试剂盒 | Up to four 96 well plates | Z25609 |
| Zenon pHrodo iFL Red Mouse IgG标记试剂盒 | Up to four 96 well plates | Z25610 |
| Zenon pHrodo iFL Green Human IgG标记试剂盒 | Up to four 96 well plates | Z25611 |
| Zenon pHrodo iFL Red Human IgG 标记试剂盒 | Up to four 96 well plates | Z25612 |
| Zenon pHrodo iFL Green Human IgG标记试剂盒5x大包装 | Up to twenty 96 well plates | Z25613 |
| Zenon pHrodo iFL Red Human IgG 标记试剂盒5x大包装 | Up to twenty 96 well plates | Z25614 |
| Zenon pHrodo iFL Deep Red Mouse IgG 标记试剂盒 | Up to four 96 well plates | Z25622 |
| Zenon pHrodo iFL Deep Red Human IgG 标记试剂盒 | Up to four 96 well plates | Z25618 |
| 产品名称 | 标记规格 | SKU |
|---|---|---|
| pHrodo Deep Red 抗体标记试剂盒 | 3 x 100 µg | P35355 |
| pHrodo Deep Red 抗体标记试剂盒 | 3 x 1 mg | P35356 |
| pHrodo iFL Red 微量蛋白标记试剂盒 | 3 x 20 µg | P36014 |
| pHrodo iFL Green 微量蛋白标记试剂盒 | 3 x 20 µg | P36015 |
| pHrodo iFL Red 抗体标记试剂盒 | 3 x 100 µg | P36020 |
| pHrodo iFL Red 抗体标记试剂盒 | 3 x 1 mg | P36021 |
| pHrodo iFL Green 抗体标记试剂盒 | 3 x 100 µg | P36022 |
| pHrodo iFL Green 抗体标记试剂盒 | 3 x 1 mg | P36023 |
| 产品名称 | 标记规格 | SKU |
|---|---|---|
| pHrodo Deep Red TFP 酯（氨基反应性） | 3 x 100 µg | P35358 |
| pHrodo Deep Red TFP酯（氨基反应性） | 1 mg | P35359 |
| pHrodo iFL Red STP 酯（氨基反应性） | 3 x 100 µg | P36011 |
| pHrodo iFL Red STP 酯（氨基反应性） | 1 mg | P36010 |
| pHrodo iFL Green STP 酯（氨基反应性） | 3 x 100 µg | P36013 |
| pHrodo iFL Green STP 酯（氨基反应性） | 1 mg | P36012 |
| 产品名称 | 标记规格 | SKU |
|---|---|---|
| SiteClick Antibody 叠氮修饰试剂盒（单独订购时不包含 sDIBO 标签） | 100mg | S20026 |
| Click-iT pHrodo iFL Red sDIBO 炔烃，用于抗体标记 | 100mg | C20034 |
| SiteClick pHrodo Deep Red sDIBO 炔烃 | 250 μg | S10914 |
| SiteClick pHrodo Deep Red sDIBO 炔烃 | 1 mg | S10915 |
| SiteClick pHrodo iFL Red sDIBO 炔烃 | 1 mg | S10903 |
| SiteClick pHrodo iFL Red sDIBO 炔烃 | 5 mg | S10908 |
| 产品名称 | 标记规格 | SKU |
|---|---|---|
| Zenon pHrodo iFL Green Mouse IgG 标记试剂盒 | Up to four 96 well plates | Z25609 |
| Zenon pHrodo iFL Red Mouse IgG标记试剂盒 | Up to four 96 well plates | Z25610 |
| Zenon pHrodo iFL Green Human IgG标记试剂盒 | Up to four 96 well plates | Z25611 |
| Zenon pHrodo iFL Red Human IgG 标记试剂盒 | Up to four 96 well plates | Z25612 |
| Zenon pHrodo iFL Green Human IgG标记试剂盒5x大包装 | Up to twenty 96 well plates | Z25613 |
| Zenon pHrodo iFL Red Human IgG 标记试剂盒5x大包装 | Up to twenty 96 well plates | Z25614 |
| Zenon pHrodo iFL Deep Red Mouse IgG 标记试剂盒 | Up to four 96 well plates | Z25622 |
| Zenon pHrodo iFL Deep Red Human IgG 标记试剂盒 | Up to four 96 well plates | Z25618 |
| 产品名称 | 标记规格 | SKU |
|---|---|---|
| pHrodo Deep Red 抗体标记试剂盒 | 3 x 100 µg | P35355 |
| pHrodo Deep Red 抗体标记试剂盒 | 3 x 1 mg | P35356 |
| pHrodo iFL Red 微量蛋白标记试剂盒 | 3 x 20 µg | P36014 |
| pHrodo iFL Green 微量蛋白标记试剂盒 | 3 x 20 µg | P36015 |
| pHrodo iFL Red 抗体标记试剂盒 | 3 x 100 µg | P36020 |
| pHrodo iFL Red 抗体标记试剂盒 | 3 x 1 mg | P36021 |
| pHrodo iFL Green 抗体标记试剂盒 | 3 x 100 µg | P36022 |
| pHrodo iFL Green 抗体标记试剂盒 | 3 x 1 mg | P36023 |
| 产品名称 | 标记规格 | SKU |
|---|---|---|
| pHrodo Deep Red TFP 酯（氨基反应性） | 3 x 100 µg | P35358 |
| pHrodo Deep Red TFP酯（氨基反应性） | 1 mg | P35359 |
| pHrodo iFL Red STP 酯（氨基反应性） | 3 x 100 µg | P36011 |
| pHrodo iFL Red STP 酯（氨基反应性） | 1 mg | P36010 |
| pHrodo iFL Green STP 酯（氨基反应性） | 3 x 100 µg | P36013 |
| pHrodo iFL Green STP 酯（氨基反应性） | 1 mg | P36012 |
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仅供科研使用，不可用于诊断目的。