配体内化(Ligand Internalization)是一种由受体介导的内吞作用,细胞在该过程中将仅摄取结合到细胞表面特异性受体蛋白的细胞外分子。配体内化是一种重要的细胞信号事件,我们可提供多种以常见受体为靶标的荧光配体。

 

 

 


免洗法检测配体内化

特异性受体介导的内吞途径可通过荧光配体——包括靶向 EGF、LDL 和转铁蛋白等常见受体的 pHrodo™ 染料标记物进行检测。

采用 pHrodo™ Red 或 pHrodo™ Green 染料,可区分从早期内体到溶酶体形成的内化途径阶段,且无需淬灭和洗涤步骤,极为方便。

pHrodo™ 染料在中性 pH 值时几乎不发荧光,随着 pH 降低,Red(红色)或 Green(绿色)荧光信号逐渐增强。而荧光信号的增强则可用于检测内吞途径的过程。

配体内化

小鼠单核细胞/巨噬细胞(MMM 细胞,ATCC)在活细胞成像溶液中采用pHrodo™ Red 偶联的转铁蛋白处理,并使用 >NucBlue Live ReadyProbes™ 试剂进行核复染。标记转铁蛋白的内化的位置可见红色点状光斑。


基于淬灭或洗涤法检测配体内化

特异性受体介导的内吞途径可通过包括靶向 EGF、LDL 和转铁蛋白等常见受体的各种荧光配体进行检测。

Alexa Fluor 染料可与一系列配体结合,为每种配体提供多种波长和单次激发检测选择。检测需要一个洗涤步骤去除细胞表面未结合的偶联物,或者淬灭掉胞外信号。

配体内化

A431 细胞中的转铁蛋白和转铁蛋白受体成像。

A431 细胞与绿色荧光lexa Fluor 488 transferrin一起孵育,然后固定和透化。采用抗转铁蛋白受体、小鼠 IgG1 单克隆抗体标记转铁蛋白受体,然后采用红色荧光 Alexa Fluor 555 山羊抗小鼠 IgG 抗体进行成像。黄色荧光指示的为共定位区域。采用 DAPI 染色细胞核。


配体内化分析产品选择指南

 
读值
免洗检测,通过荧光强度对受体介导的内吞作用成像
检测范围
检测早期内体到早期溶酶体的形成过程
载体
EGF 
转铁蛋白Transferrin 
常用检测通道
TRITC
FITC
TRITC
标记颜色
pHrodo™ Red
pHrodo™ Green
pHrodo™ Red
Ex/Em (nm)
560/585
509/533
560/585
Signal-To-Noise Ratio(信噪比)
光稳定性
多重分析兼容性
活细胞
固定细胞
可固定
检测平台*
I, M, FC
产品规格
20 µg
20 µg
1 mg
货号
*I = 显微镜成像,M = 微孔板,FC = 流式细胞分析。
 
读值
基于淬灭或洗涤的检测,通过荧光强度对受体介导的内吞作用成像
检测范围
荧光信号不受内吞进程变化
载体
LDL
转铁蛋白Transferrin
EGF
常用检测通道
Texas Red®
FITC
FITC
Texas Red®
FITC
TRITC
标记颜色
Alexa Fluor® 594
Alexa Fluor® 488
Alexa Fluor® 488
Alexa Fluor® 594
Alexa Fluor® 488
Alexa Fluor® 555
Ex/Em (nm)
590/617
495/519
495/519
590/617
495/519
555/565
Signal-To-Noise Ratio(信噪比)
光稳定性
参考文献
多重分析兼容性
活细胞
固定细胞
可固定
检测平台*
显微镜成像
产品规格
200 µL
200 µL
5 mg
5 mg
100 µg
100 µg
货号
 
读值
免洗检测,通过荧光强度对受体介导的内吞作用成像
检测范围
检测早期内体到早期溶酶体的形成过程
载体
EGF 
转铁蛋白Transferrin 
常用检测通道
TRITC
FITC
TRITC
标记颜色
pHrodo™ Red
pHrodo™ Green
pHrodo™ Red
Ex/Em (nm)
560/585
509/533
560/585
Signal-To-Noise Ratio(信噪比)
光稳定性
多重分析兼容性
活细胞
固定细胞
可固定
检测平台*
I, M, FC
产品规格
20 µg
20 µg
1 mg
货号
*I = 显微镜成像,M = 微孔板,FC = 流式细胞分析。
 
读值
基于淬灭或洗涤的检测,通过荧光强度对受体介导的内吞作用成像
检测范围
荧光信号不受内吞进程变化
载体
LDL
转铁蛋白Transferrin
EGF
常用检测通道
Texas Red®
FITC
FITC
Texas Red®
FITC
TRITC
标记颜色
Alexa Fluor® 594
Alexa Fluor® 488
Alexa Fluor® 488
Alexa Fluor® 594
Alexa Fluor® 488
Alexa Fluor® 555
Ex/Em (nm)
590/617
495/519
495/519
590/617
495/519
555/565
Signal-To-Noise Ratio(信噪比)
光稳定性
参考文献
多重分析兼容性
活细胞
固定细胞
可固定
检测平台*
显微镜成像
产品规格
200 µL
200 µL
5 mg
5 mg
100 µg
100 µg
货号