Dynabeads® kilobaseBINDER™ 试剂盒用于固定长 (>2 kb) 双链 DNA 分子。将 PCR 产物固定到链霉亲和素偶联 Dynabeads® 的传统方法表明，DNA 的固定量取决于片段大小。当片段超过 2 kb 时，由于空间位阻，结合效率显著降低（图1）。kilobaseBINDER™ 试剂盒的结合溶液中含有一种已获得专利的固定化激活剂，它可显著提高长生物素化 DNA 分子的结合效率。
Dynabeads kilobasedBINDER 试剂盒的优势
- 提高长 (>2 kb) 生物素化 dsDNA 片段
- 的结合能力
- 从细胞质中快速、有效和简单纯化核酸
- 数分钟内完成染色质分离
图 1. B&W 缓冲液（红色）是建议与链霉亲和素偶联 Dynabeads® 配合使用的标准结合和洗涤缓冲液。专门设计的结合溶液（绿色）可显著提高结合能力。
图 2. DNA 包被的 Dynabeads®（红色）可在非洲爪蟾蛋提取物中组装一个有丝分裂纺锤体（绿色），其与正常分裂细胞中的纺锤体相差无几 (1)。每毫克 Dynabeads®对8kb 生物素化 DNA 片段的结合能力通常为 20 µg (3.8 pmol)。由德国海德堡 EMBL 的 R. Heald、E Karsenti 和 A. Hyman 提供。
细胞生物学的多种创新应用都采用了这种方法，包括
- 模拟染色体的染色质珠，用于研究微管自行融入到双极纺锤体中（参考文献1和图2）
- 用于研究体外细胞核RNA输出的合成细胞核 (2)
- 体外重建细胞核沿微管的运动并调查这种运动的分子基础 (3)
- 使用限制性内切酶测定和 DNase 足迹法对重建的染色质 DNA 片段上的糖皮质激素受体结合位点进行体外分析 (4)
- 非洲爪蟾和果蝇 DNA 结合蛋白的募集分析 (5, 6)
部分参考文献
- Heald R et al (1996) Nature.382:420-425
- Arts GJ et al (1997) Biol.Chem.Hoppe Seyler.378:641-649
- Reinsch S et al (1997) Curr.Biol.7:211-214
- Fletcher TM et al (2000) Mol.Cell.Biol.20(17):6466-6475
- Edwards MC et al (2002) J. Biol.Chem.277(36):33049-33057
- Ikeda K et al (2002) Mol.Cell.Biol.22(19):6759-6766
仅供科研使用，不可用于诊断目的。