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使用你的 T7 表达克隆获取更高的蛋白得率

  • 花费少得多的手动操作时间，同时获得 3-10 倍高的蛋白得率
  • 实验方案简单，消除了冗长的 OD 监控及诱导步骤
  • 兼容配方可用于所有的 T7 调控的大肠杆菌载体及 BL21 和衍生菌株

T7 调控的大肠杆菌表达系统及 BL21 宿主使用简单、得率相对较高、培养规模简单可调，常被选用来制备重组蛋白质。现在你可以进一步提高得率，并使这一已经很简单的表达系统变得更加简单——只需要换用 MagicMedia™ 大肠杆菌表达培养基即可。

超高蛋白得率

MagicMedia™ 配方提供了理想条件，可有效调控众多大肠杆菌 系统所用的 T7 启动子表达。通常，这会得到高密度培养物，获得高重组蛋白得率，并超过使用添加 IPTG 诱导剂的 LB 培养基所获得的重组蛋白得率（图 1）。

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图 1.  使用 MagicMedia™  大肠杆菌 培养基可提高蛋白得率。 

使用 Gateway 克隆，将八种不同的人 ORF 克隆到 Champion™ pET300/NT-DEST 载体中。将阳性克隆转化到 BL21 (DE3)  大肠杆菌中。这些克隆在 LB + IPTG（泳道 1）、即用型液体 MagicMedia™ 培养基（泳道 2）或由粉末（SoluPouch™ 规格）制备的 MagicMedia™ 培养基（泳道 3）中均有表达。在使用考马斯染色的 NuPAGE Novex 4–12% Bis-Tris 凝胶上，对 200 微升每种培养物进行裂解并分析。M：SeeBlue 蛋白标准品

十分便捷
MagicMedia™  大肠杆菌 表达培养基非常简单易用，与传统的 LB + IPTG 方法不同，此方法无需耗时的光密度 (OD) 监控和诱导步骤。只需使用合适的种子培养物接种制备好的 MagicMedia™ 培养基，过夜培养和收获即可（图 2）。此外，与 LB 方法所需的体积相比，使用 MagicMedia™ 配方时所需的 大肠杆菌 培养体积显著减少，从而简化了操作和放大工艺。MagicMedia™ 培养基也是高通量应用中高效同时表达大量克隆的理想选择。

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图 2.  轻松的 MagicMedia™ 实验方案。 

两种全包规格：粉末和液体
MagicMedia™  大肠 杆菌 表达培养基由专利组分 A 和 B 组成，具有两种便捷规格，可满足特定需求，预混粉末或为水溶解袋（SoluPouch™ 规格）便捷包装，或为即用型预灭菌液体包装。对于 SoluPouch™ 规格，只需将包含组分 A 粉末的整个包装袋放入水中和高压釜中。SoluPouch™ 和粉末将完全溶解——包装袋不会对培养的细胞产生任何影响。然后，加入液体组分 B 和抗生素。无需称量物料，无需费力，也无需额外试剂（选择试剂除外）。对于即用型液体规格，只需混合组分 A 和 B 并添加抗生素即可，不必高压灭菌。无论采用哪种规格，都能看到将 MagicMedia™ 培养基并入现有的 大肠杆菌 表达程序非常简单。

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仅供科研使用，不可用于诊断目的。