Mutagénesis de sitio dirigido

Sistemas y kits sólidos y de alta eficacia para agilizar su flujo de trabajo

• Velocidad: el tiempo de obtención de resultados suele ser inferior a 3 horas para plásmido de 3 Kb.
• Precisión: alteración de hasta 25 nucleótidos (nt) cuando ha mutado solo un sitio.
• Flexibilidad: genere sustituciones, eliminaciones o inserciones en casi cualquier plásmido.
• Sencillez: la herramienta gratuita en línea le guiará a través de la construcción y el diseño de primers y generará la secuencia de construcción final para una implementación sencilla.

Alta eficacia de mutagénesis. La mutagénesis de base múltiple es común y hemos probado una sustitución, inserción y eliminación de 12 bases mediante un plásmido pUC19. Se llevó a cabo una sustitución de 12 bases aleatorias en un solo primer mutado. Alternativamente, se insertó un oligonucleótido aleatorio de 12 bases que contenía un codón de terminación en el plásmido pUC19 de tipo salvaje, seguido de la eliminación de las 12 bases exactas para restablecer el plásmido de tipo salvaje.

Alta eficacia de mutagénesis. La eficacia de la mutagénesis para una sustitución, inserción o eliminación de 12 bases fue superior al 90 %. El rendimiento del kit de mutagénesis de sitio dirigido GeneArt era comparable a la última generación de kits de la competencia 'Q'.

Eficacia de la mutagénesis dirigida multisitio La figura indica la eficacia de la mutagénesis dirigida multisitio de 3 sitios de 1 o 3 pb cada uno en plásmidos de 5, 10 y 14 kb. En todos los casos, los sitios mutados (de 1 o 3 pb cada uno) incluyeron una inserción, una eliminación y una sustitución cada uno. El rendimiento del sistema PLUS de mutagénesis de sitio dirigido GeneArt era comparable a la última generación de kits de mutagénesis dirigida multisitio de la competencia.