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Intro text
El citómetro de flujo Attune NxT es un analizador celular avanzado en el que la fluídica de enfoque acústico es la clave tanto para una alta sensibilidad como para un alto rendimiento.
El citómetro de flujo Attune NxT comparte características comunes con el modelo Attune CytPix.
Enfoque acústico para conseguir sensibilidad
Adquisición rápida y precisa
Detección de acontecimientos raros
Diseñado para lograr flexibilidad
Novedoso diseño óptico
Tecnología resistente a las obstrucciones
Software avanzado e intuitivo
Compatible con cabinas de bioseguridad
Para nuestro citómetro de flujo mejorado mediante adquisición de imágenes, consulte el modelo Attune CytPix .
Casi cualquier aplicación de citometría de flujo estándar puede beneficiarse de la alta sensibilidad y rendimiento del citómetro de flujo Attune NxT. Vea nuestra página de datos de muestra para ejemplos que abarcan la investigación de enfermedades infecciosas, proteínas fluorescentes, edición de genes por CRISPR, investigación inmunooncológica, microbiología, ploidía vegetal, plaquetas, células madre y linfocitos T.
Una aplicación clásica de citometría de flujo es el inmunofenotipado. La citometría de flujo es el método preferido para identificar células dentro de poblaciones heterogéneas complejas, ya que permite el análisis multiparamétrico de miles a millones de células en un corto espacio de tiempo. La intensa separación de señales en el citómetro de flujo Attune NxT muestra una excelente separación de las poblaciones celulares en subconjuntos para el inmunofenotipado. Una amplia gama de opciones de reactivos, así como el módulo de compensación automatizado del sistema, cuatro láseres con separación espacial y 14 opciones de color, que contribuyen a simplificar el diseño de los paneles multicolores.
Estrategia de delimitación para el análisis de inmunofenotipado de 13 colores de sangre entera humana teñida mediante un protocolo de tinción/lise. Las células sanguíneas completas humanas se tiñeron como se describe en la nota de aplicación y se adquirieron y analizaron en el citómetro de flujo Attune NxT. (A) Las células muertas se excluyeron del análisis mediante la delimitación de células vivas (yoduro de propidio–) en un gráfico de puntos. (B) La delimitación de CD45+ se utilizó para seleccionar la población de leucocitos de la sangre entera lisada. (C) Los linfocitos y los monocitos se identificaron en función de los perfiles de dispersión lateral y de avance. (D) Los monocitos se encuentran por encima de los linfocitos en el gráfico de dispersión y expresan CD14 y CD33. (F) Dentro de la delimitación de linfocitos, las células inmunitarias se pueden subdividir en función de su expresión de CD3 (linfocitos T), CD19 (linfocitos B) o ninguna (linfocitos NK). (E) Los linfocitos B se pueden caracterizar posteriormente mediante la expresión HLA-DR y CD45RA. (G) Los linfocitos T pueden subdividirse en subpoblaciones de CD4+ (linfocitos T auxiliares) y CD8+ (linfocitos T citotóxicos), mientras que (J) los linfocitos T reguladores expresan CD4 y CD25. (H, K) CD62L identifica los linfocitos T CD4 y CD8 indiferenciados (TN), mientras que HLA-DR se expresa mediante linfocitos T activados (TA). (I) Finalmente, los linfocitos NK carecen de marcadores de linfocitos B y T (CD19–CD3–) y expresan CD56.
Láseres | Configuración del láser | Láseres incluidos, n.º de canales de detección | Canales de detección totales* | Número de categoría | ||||
---|---|---|---|---|---|---|---|---|
Violeta, 405 nm | Azul, 488 nm | Amarillo, 561 nm | Verde, 532 nm | Rojo, 637 nm | ||||
1 | Azul | ✝ | 4 | ✝ | ✝ | ✝ | 6 | A24864 |
2 | Azul/verde | ✝ | 3 | 4 | ✝ | 9 | A28995 | |
Azul/amarillo | ✝ | 3 | 4 | ✝ | 9 | A24861 | ||
Azul/rojo | ✝ | 4 | ✝ | ✝ | 3 | 9 | A24863 | |
Azul/violeta | 4 | 4 | ✝ | ✝ | ✝ | 10 | A24862 | |
Azul/violeta 6 | 6 | 3 | ✝ | ✝ | 11 | A29002 | ||
3 | Azul/verde/rojo | ✝ | 3 | 4 | 3 | 12 | A28997 | |
Azul/rojo/amarillo | ✝ | 3 | 4 | 3 | 12 | A28993 | ||
Azul/verde/violeta | 4 | 3 | 4 | ✝ | 13 | A28999 | ||
Azul/violeta/amarillo | 4 | 3 | 4 | ✝ | 13 | A24859 | ||
Azul/rojo/violeta | 4 | 4 | ✝ | ✝ | 3 | 13 | A24860 | |
Azul/rojo/violeta 6 | 6 | 3 | ✝ | 3 | 14 | A29003 | ||
4 | Azul/rojo/violeta/verde | 4 | 3 | 4 | 3 | 16 | A29001 | |
Azul/rojo/amarillo/violeta | 4 | 3 | 4 | 3 | 16 | A24858 | ||
Azul/rojo/amarillo/violeta 6 | 6 | 2 | 3 | 3 | 16 | A29004 | ||
*En el número de canales de detección se incluyen todos los canales de fluorescencia, así como un canal de dispersión directa y uno de dispersión lateral. ✝Actualización de láser disponible |
Sistema óptico: Detección de fluorescencia | Energía láser
| Láser | Longitud de onda (nm) | Óptica con forma de haz (BSO)* (mW) | Potencia de diodo** (mW) |
Violeta | 405 | 50 | 100 | ||
Azul | 488 | 50 | 100 | ||
Verde | 532 | 100 | 140 | ||
Amarillo | 561 | 50 | 100 | ||
Rojo | 637 | 100 | 140 | ||
* Cantidad de energía láser utilizable medida después de que la luz haya pasado a través de la óptica del haz y los filtros de conformación. ** Máximo teórico especificado por el proveedor. | |||||
Excitación del láser | Excitación optimizada para reducir al mínimo el ruido de las líneas láser parásitas y las pérdidas por reflexión | ||||
Perfil del láser | Láser plano de 10 x 50 μm para una alineación sólida | ||||
Filtros de emisión | Hasta 14 canales de color con tubos fotomultiplicadores (PMT) ajustados por longitud de onda; filtros con clave intercambiables por el usuario | ||||
Separación del láser | 150 μm | ||||
Alineación de la óptica | Alineación fija con fibra soldada prealineada; no requiere mantenimiento por parte del usuario | ||||
Refrigerador termoeléctrico integrado | Sin retardo de calentamiento; la fibra no se ve afectada por el “encendido/apagado” | ||||
Modo de contención | El “encendido/apagado instantáneo” reduce el uso y/o el envejecimiento hasta 10 veces; solo se mantiene encendido cuando se adquieren muestras; informa de las horas de uso | ||||
Láser de superficie plana especificado en la celda de flujo | Coeficiente de variación (CV) <3 % sobre el ancho del láser de superficie plana | ||||
Actualizable | Cambios de campo prácticos | ||||
Fluídica | Celda de flujo | Gel de cubeta de cuarzo acoplado a una lente de recogida de apertura numérica de 1,2 (NA), 200 x 200 μm | |||
Volumen de análisis de muestras | 20 μl-4 ml | ||||
Caudales de muestra personalizados | 12,5-1000 μl/min | ||||
Suministro de la muestra | Bomba de jeringa de desplazamiento positivo para análisis volumétricos | ||||
Tubos para muestras | Compatible con tubos de 17 x 100 mm a 8,5 x 45 mm | ||||
Detección del nivel de líquido | Activo | ||||
Depósitos de líquido estándar | Tanque de líquido de enfoque de 1,8 l, tanque de residuos de 1,8 l, tanque de solución de cierre de 175 ml y tanque de solución de lavado de 175 ml | ||||
Almacenamiento de líquidos | Todos los fluidos se almacenan en el instrumento | ||||
Opción de fluídica ampliada | Configuración para 10 l de fluido. | ||||
Consumo nominal de fluido | 1,8 l/día | ||||
Ciclos de mantenimiento automatizados | ≤15 minutos de puesta en marcha y apagado: modos de limpieza profunda, desinfección y depuración | ||||
Rendimiento: Detección de fluorescencia | Sensibilidad de fluorescencia | ≤80 moléculas de fluorocromo soluble equivalente (MEF) para FITC, ≤30 MEF para PE, ≤70 MEF para APC | |||
Resolución de fluorescencia | CV < 3 % en el pico singlete de núcleos de eritrocitos de pollo (CEN) teñidos con yoduro de propidio | ||||
Velocidad de adquisición de datos | Hasta 35.000 eventos/s, 34 parámetros, basados en una tasa de coincidencia del 10 % según las estadísticas de Poisson | ||||
Velocidad electrónica máxima | 65.000 eventos/s con todos los parámetros | ||||
Arrastre | Formato de tubo único: < 1 % | ||||
Sensibilidad de dispersión directa y lateral | Capaz de discriminar plaquetas del ruido | ||||
Resolución de dispersión directa y lateral | Optimizada para resolver linfocitos, monocitos y granulocitos en sangre total lisada | ||||
Dispersión directa | Detector de fotodiodos con filtro de paso de banda de 488/10 nm | ||||
Dispersión lateral | PMT con filtro de paso de banda predeterminado de 488/10 nm; filtro de paso de banda opcional de 405/10 nm | ||||
Detectores de fluorescencia | 14 detectores individuales | ||||
Pulso electrónico | Área medida, altura y ancho de pulso en todos los detectores | ||||
Resolución de la dispersión lateral violeta | Se puede configurar para que la dispersión lateral violeta detecte mejor las partículas con respecto al ruido | ||||
Tamaño mínimo de partículas | 0,2 μm de dispersión lateral con el kit de calibración de microesferas de submicras de los laboratorios Bangs; 0,1 μm de dispersión lateral en las siguientes condiciones: Con una configuración de bloques de 0,5 mm estándar del citómetro de flujo Attune NxT, un filtro Invitrogen Attune NxT 488/10 (núm. de cat. 100083194) y el fluido de enfoque de Attune (núm de cat. 4488621, 4449791 o A24904) que se ha pasado a través de un filtro de 0,025 µm | ||||
Software | Compensación | Matriz completa: modos automático y manual, herramientas de compensación en el gráfico para un llevar a cabo un ajuste preciso; uso de tubos y pocillos | |||
Caudal | Control preciso del caudal mediante el software; sin necesidad de realizar ajustes en el hardware | ||||
Transmisión en directo | Actualización en tiempo real de las estadísticas durante la adquisición de eventos de hasta 35.000 eventos/seg | ||||
Superposiciones | Análisis comparativo entre muestras; vista en 3D | ||||
Recuperación de la muestra | Sistema capaz de devolver las muestras que no se han utilizado | ||||
Concentración | Medición directa de la concentración sin necesidad de microesferas de recuento | ||||
Presentación del software | Totalmente personalizable en cada cuenta de usuario | ||||
Tecnología de detección de burbujas | Detiene el análisis automatizado para preservar la integridad de las muestras | ||||
Máximo de archivos de evento único | 20 millones con opción de adjuntar | ||||
Mapa de calor | Configuración de la definición del diseño de las placas; vista de cribado para el análisis de tubos y placas | ||||
Umbral | Hasta cuatro umbrales individuales; el usuario tiene la opción de aplicar lógica booleana | ||||
Delimitación | Delimitación jerárquica con capacidad de deducir límites | ||||
Tensión | El usuario puede regularlo | ||||
Extensiones de ventana | El usuario puede regularlo | ||||
Factor de escala de área (ASF) | El usuario puede regularlo | ||||
Ajustes de adquisición | Se documenta en archivos FCS y se conserva al importar | ||||
Plantillas | Se crean a partir de experimentos que ya existen: ajustes de instrumentos, espacios de trabajo, protocolos de análisis, ajustes del mapa de calor y de compensación optimizados y definidos previamente | ||||
Conversión de tubo a placa | Transición con un clic de tubos a placas y viceversa; sin necesidad de desmontaje ni CC adicional; tampoco es necesario el reinicio para llevar a cabo la conversión entre placas y tubos | ||||
Resolución de gráficos | Imágenes con calidad de publicación; compatibilidad con TIF, PNG, BMP, JPG, GIF y EMF; copia y pegado rápido de gráficos a cualquier aplicación externa (por ejemplo, al software Microsoft™ PowerPoint™) | ||||
Administración de cuentas de usuario | Creación administrativa de cuentas de usuario individuales con funciones designadas, permisos de configuración avanzada, gestión de cuentas individuales, seguimiento de tiempo de los usuarios y recuento de muestras | ||||
Calidad y normativa | Seguimiento del instrumento | Prueba diaria automatizada de línea base y rendimiento con gráficos de Levey-Jennings | |||
Garantía | 1 año | ||||
Pruebas de verificación de la producción | Cada instrumento se prueba y se verifica para comprobar la integridad del montaje y del rendimiento según las especificaciones | ||||
Sistema de gestión de la calidad | Las normas de fabricación cumplen los requisitos de la norma ISO 13485:2003 | ||||
Especificaciones de instalación sólidas | El técnico se encarga de la instalación de las unidades; la lista de comprobación previa a la planificación, la entrega, la instalación y el cumplimiento de la validación del rendimiento con el procedimiento estandarizado | ||||
Estado normativo | Para uso exclusivo en investigación | ||||
Ordenador | Requisitos de software: | Software citométrico Invitrogen Attune | |||
Monitor | Pantalla plana de 23 pulgadas (resolución de 1920 x 1080); capacidad para dos monitores | ||||
Ordenador | Ordenador de sobremesa minitorre | ||||
Sistema operativo | Microsoft™ Windows™ 10 de 64 bits | ||||
Formato FCS | FCS 3.1, 3.0 | ||||
Procesador | Procesador Intel™ Core™ i7 | ||||
RAM | 32 GB | ||||
Discos duros | 2 SATA de 2 TB, 3,0 Gb/s, caché de ráfagas de datos de 8 MB; controlador RAID1, integrado | ||||
Requisitos para la instalación | Requisitos eléctricos | 100-240 VCA, 50/60 Hz, <150 W | |||
Disipación de calor | < 150 W | ||||
Rango de temperatura de funcionamiento | de 15 a 30 °C (de 59 a 86 °F) | ||||
Humedad de funcionamiento | del 10 al 90 %, sin condensación | ||||
Ruido acústico | < 65 dBA a 1,0 m | ||||
Tamaño del instrumento (Al. x An. x Pr.) | ~40 x 58 x 43 cm (16 x 23 x 17 pulg.), incluidas las botellas de líquido | ||||
Peso | ~29 kg (64 libras) |
Para uso exclusivo en investigación. No apto para uso en procedimientos diagnósticos.