Análisis cuantitativo del potencial de diferenciación en tres linajes
El panel Scorecard™ de hPSC TaqMan® evalúa la pluripotencia y el potencial de diferenciación en tres linajes mediante ensayos de qPCR (reacción en cadena de la polimerasa cuantitativa) en tiempo real y un software de análisis de datos intuitivo.
Cuantificación del potencial de diferenciación en tres linajes de sus PSC (células madre pluripotentes)
El ensayo Scorecard™ de hPSC fue desarrollado en colaboración con Alex Meissner y surge de su histórica publicación (Cell 144:439-452 (2011)). El software de análisis complementario aporta a los investigadores de cualquier parte del mundo la capacidad de comparar los perfiles de expresión génica de sus líneas de células con un conjunto común de referencia.
Requisitos de instrumentos
Vea qué instrumentos son compatibles con panel Scorecard™ de hPSC TaqMan® y cómo configurarlos.
Análisis de datos
El panel Scorecard™ de hPSC TaqMan® incluye acceso gratuito a un software intuitivo y gratuito basada en web que permite a los investigadores comparar cuantitativamente el perfil de expresión génica de su muestra con el de un conjunto de referencia.
Servicios CellModelTM
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Los paneles Scorecard™ de hPSC TaqMan® confirman cuantitativamente la pluripotencia (el potencial de diferenciación en tres linajes)
tanto para líneas de células madre pluripotentes inducidas como embrionarias. El panel Scorecard™ de hPSC (disponible en formato de 96 y 384 pocillos) contiene 94 ensayos de expresión génica TaqMan® predefinidos (incluidos controles endógenos) secados en los pocillos de la placa de ensayo. El panel de genes fue desarrollado en colaboración con Alex Meissner y sobre la base de su histórica publicación (Cell 144:439-452 (2011)).
El panel Scorecard™ de hPSC TaqMan® ofrece lo siguiente:
- Un ensayo cuantitativo para la confirmación de la pluripotencia y el potencial de diferenciación en tres linajes
- Una comparación de los perfiles de expresión con un estándar de referencia
- Una plataforma fácil de usar con ensayos previamente en placas y un software de análisis exclusivo e intuitivo
Descripción del protocolo:
- Probar las muestras no diferenciadas, de diferenciación espontánea (cuerpos embrioides, EB) o de diferenciación dirigida (monocapa)
- Extraer y purificar el ARN
- Generar el ADNc
- Ejecutar la expresión génica en un panel o un instrumento compatible con reacción en cadena de la polimerasa cuantitativa en tiempo real (qRT-PCR)
- Cargar los archivos .eds en el software de análisis Scorecard™ de hPSC
- Analizar los datos y exportar los resultados de la cómoda aplicación de análisis basada en la nube
Cómo ejecutar el ensayo Scorecard™ de hPSC
ESC/iPSC sin diferenciar
ESC/iPSC diferenciadas: Cuerpos embrioides (semana 1) o células directamente diferenciadas.
Requisitos de la muestra: >1 x 106 células/muestra
ESC/iPSC sin diferenciarCultivo dependiente de alimentación
Cultivo sin alimentación | ESC/iPSC diferenciadas (EB) |
Aislamiento de ARN
| Fórmulas Extracción de fase orgánica TRIzol® Requisitos de la muestra: 1 ml de reactivo TRIzol® por cada 6 cm de plato de cultivo [ARN] (mg/ml) = A260 * 40 Se recomienda un coeficiente de A260/A280 = 1.6 – 1.8 |
8 reacciones de transcripción inversa (RT) por muestra de ARN
Descargar la plantilla de ejecución
Tipo de experimento: Curva estándar
Configuración de 384 pocillos
- Panel Scorecard™ de hPSC TaqMan® de 384 pocillos
- Kit Scorecard™ de hPSC TaqMan® de 384 pocillos
- Mezcla maestra de expresión génica TaqMan®
Configuración de 96 pocillos
Analice los datos del panel Scorecard™ de hPSC TaqMan® utilizando el intuitivo software de análisis.
Inicie sesión en el software de análisis Scorecard™ de hPSC.
- Obtenga más información acerca del software y el análisis de los datos
ESC/iPSC sin diferenciar
ESC/iPSC diferenciadas: Cuerpos embrioides (semana 1) o células directamente diferenciadas.
Requisitos de la muestra: >1 x 106 células/muestra
ESC/iPSC sin diferenciarCultivo dependiente de alimentación
Cultivo sin alimentación | ESC/iPSC diferenciadas (EB) |
Aislamiento de ARN
| Fórmulas Extracción de fase orgánica TRIzol® Requisitos de la muestra: 1 ml de reactivo TRIzol® por cada 6 cm de plato de cultivo [ARN] (mg/ml) = A260 * 40 Se recomienda un coeficiente de A260/A280 = 1.6 – 1.8 |
8 reacciones de transcripción inversa (RT) por muestra de ARN
Descargar la plantilla de ejecución
Tipo de experimento: Curva estándar
Configuración de 384 pocillos
- Panel Scorecard™ de hPSC TaqMan® de 384 pocillos
- Kit Scorecard™ de hPSC TaqMan® de 384 pocillos
- Mezcla maestra de expresión génica TaqMan®
Configuración de 96 pocillos
Analice los datos del panel Scorecard™ de hPSC TaqMan® utilizando el intuitivo software de análisis.
Inicie sesión en el software de análisis Scorecard™ de hPSC.
- Obtenga más información acerca del software y el análisis de los datos