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Neon NxT Electroporation System： |
性能、速度、簡便性、柔軟性を追求して設計されたコンパクトなエレクトロポレーション装置は、貴重な研究時間とサンプルを保護します。Invitrogen Neon NxT Electroporation System独自のピペットチップテクノロジー、簡素化されたワークフロー、柔軟性を組み合わせることで、サンプルの損失の低減、汚染リスクの低減、ステップの節約、実験のコントロールを可能にします。
Neon NxT Electroporation Systemの利点
- 実績のあるトランスフェクション効率と細胞生存率—高効率かつ高い細胞生存率で、困難な細胞株をトランスフェクションします
- 貴重な研究時間の節約—簡単な3ステップのワークフローにより、96反応を15分以内にトランスフェクションできる1チャンネルピペットまたは8チャンネルピペットから選択でき、プレートモードを備えた直感的なユーザーインターフェースにより、細胞を迅速にトランスフェクションできます
- 必要に応じた柔軟性—さまざまな細胞タイプ、細胞密度、ペイロード、およびエレクトロポレーションプロトコルに合わせてエレクトロポレーションパラメータを正確に最適化します
- ゲノム編集の効率の向上—すべての細胞タイプとアプリケーションに対応する単一バッファーキットに含まれているのは、CRISPR分子でのデリバリーを改善するために最適化されたバッファーです
- 貴重なサンプルを保護—サンプル移し替えのロスや汚染リスクを最小限に抑えます
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Neon NxT Electroporation Systemのご注文
クラウドベースのアプリケーションであるInvitrogen TransfectionLabは、設計段階からエレクトロポレーション実験ごとにカスタマイズされたステップバイステップのガイドを自動的に作成します。最大384サンプルに対して複数のプレートレイアウトをリモートで設定でき、アプリに保存されたプロトコルやプレートレイアウトは、接続済みのNeon NxTシステムから直接アクセスできます。
How-to & FAQ videos
お客様事例：
Neon NxT University Lab Partnersお客様の声ビデオ
このビデオでは、University Lab Partnersの教育プログラムマネージャーであるSamantha Renuschが、Neon NxT Electroporation Systemを使用した経験を紹介しています。
このトランスフェクションシステムを使用して、幅広い種類の細胞株における高い導入効率と高い細胞生存率を実現できます
Neon NxT Electroporation Systemはエレクトロポレーション装置で、免疫細胞、初代細胞、幹細胞などのトランスフェクションが困難な細胞において、最大90%のトランスフェクションと遺伝子編集の効率を実現します。150を超える細胞株が、効率と生存率のために最適化されたすぐに使用可能な条件で試験されています。
さまざまな細胞株上で最適化されたエレクトロポレーションプロトコルを得るために、トランスフェクションプロトコルおよび引用データベースを検索します。
図1.Neon NxTエレクトロポレーションシステムにより、多様な細胞タイプで卓越したトランスフェクション効率とトランスフェクション後の細胞生存率が得られます。細胞に10 μ Lまたは100 μ Lのエレクトロポレーション反応でGFPプラスミドDNAをトランスフェクトしました。トランスフェクション効率は、GFP陽性細胞の割合（n = 3）として報告されます。トランスフェクションされた細胞をInvitrogen SYTOX Red Dead Cell Stainで染色し、Invitrogen Attune NxT Flow Cytometerで生存率を評価しました。細胞生存率は3回の測定平均で報告されています。
多くの哺乳類細胞タイプに対応する単一のバッファーキット
細胞株に適したバッファーキットを探す手間を省くことができます。当社は、150を超える哺乳類細胞株に対応する1つのバッファーキットで、プロセスを簡素化しました。Invitrogen Neon NxT再懸濁Rバッファーの使用を1,900 V未満の電圧で、高電圧でInvitrogen Neon NxT再懸濁Tバッファーの使用を推奨します。
ゲノム編集の効率向上
ゲノム編集は、ヒトの健康と病気の理解を深めるために大きな期待が寄せられています。ゲノム編集ワークフローにおいて重要でありながら困難なステップは、CRISPRリボヌクレオタンパク質（RNP）、DNA、RNA分子を、選択した細胞株（トランスフェクションとも呼ばれる）に効率的に導入することです。上記のように、エレクトロポレーションは、トランスフェクションが困難な細胞でも高いトランスフェクション効率を達成できるため、最も広く使用されている導入方法です。
当社の遺伝子編集試薬およびNeon NxT Resuspension Genome Editing BufferをNeon NxT Electroporation Systemと併用することで、初代細胞、幹細胞、トランスフェクト困難な細胞などの哺乳類細胞を用いたノックアウトやノックイン実験でのCRISPR Cas9などの特定のペイロードを用いた、ゲノム編集性能を向上させることができます（図2）。
包括的なゲノム編集ワークフローソリューションは、 thermofisher.com/geneeditingでご覧ください
図2.さまざまな細胞タイプやターゲットにおけるCRISPR-Cas9ベースのゲノム編集実験におけるNeon NxT Resuspension Genome Editing Bufferのパフォーマンス。標的遺伝子座には、JurkatおよびK562細胞に対するACTN、活性化初代T細胞に対するTRAC、HSCに対するB2M、初代NK細胞に対するAAVS1が含まれました。細胞を10 μLまたは100 μLの反応でエレクトロポレーションしました。（A）GFPドナーDNAノックイン効率をGFP陽性細胞の割合で報告。（B）GFPドナーDNAノックイン後の細胞の生存率。 （C）ノックアウト効率は、未処理の対照と比較した特定標的遺伝子座の減少率として報告されています。（D）ノックアウト細胞のエレクトロポレーション後生存率。
* 初代NK細胞では、ゲノム開裂検出（GCD）アッセイにより測定したインデル効率（%）がノックアウト効率のプロキシとして機能しました。
Neon NxT Electroporation Systemがエレクトロポレーションキュベットの代替として優れているのはなぜですか？
図3.標準的なエレクトロポレーションキュベットと比較した場合の、Neon NxTピペットチップの利点。独自の生物学的適合性 （A） Neon NxTチップは、 （B） エレクトロポレーションキュベットよりも重要な利点を持つ、実績のあるキャピラリーエレクトロポレーション技術を提供します。
標準的なキュベットをベースとしたエレクトロポレーションチェンバーとは異なり、Neon NxT Electroporation Systemではより均一な電界を形成し、生物学的に適合した独自のピペットチップ型電極を使用します。このデザインにより生理的条件をより良く維持できるようになり、従来のエレクトロポレーションと比較して高い細胞生存率を得られます。†
- より均一な電界を生成します
- エレクトロポレーションチャンバー全体で安定したpHを維持します
- 熱を最小限に抑えます
- より少ないイオンを形成します
- 細胞が受けるせん断力を低減します
さまざまな細胞タイプ、細胞密度、ペイロード、およびエレクトロポレーションプロトコル用のエレクトロポレーションパラメータを正確に最適化します
カスタマイズ可能なエレクトロポレーションパラメーター
Neon NxT Electroporation Systemを使用すると、実験に最も重要なパラメーターを正確にコントロールでき、そうでないパラメーターを調整するために貴重な時間を無駄にすることはありません。このトランスフェクションシステムでは、以下のことが可能です。
- パルス電圧
- パルス幅
- パルス数
- 細胞タイプ
- バッファータイプ
- ペイロードタイプ
さまざまなペイロード、細胞タイプ、および細胞密度に対応した汎用性
1反応あたり1 x 104～1 x 107細胞のトランスフェクションが可能な柔軟性により、DNA、RNA、タンパク質をさまざまな哺乳類細胞に導入できます。
1または8チャンネルピペットによる迅速な3ステップの細胞トランスフェクション、15分以内で96回の反応、プレートモードによる直感的なユーザーインターフェース
簡易化されたエレクトロポレーションワークフロー
Neon NxT Electroporation Systemの合理化されたワークフローは、簡単に実行でき、トレーニングは最小限で済み、一貫性と再現性が向上します。
このトランスフェクションシステムを使用すると、エレクトロポレーションのプロセスはシンプルです。まず、細胞とプラスミドミックスをNeon NxTピペットチップに取り込みます。次に、ピペットをピペットステーションにドッキングし、エレクトロポレーションを押します。最後に、トランスフェクションした細胞を培養容器に戻すだけです。トランスフェクションはピペットチップ内で行うため、わずか3つの簡単なステップでトランスフェクションが完了します。吸引、エレクトロポレート、分注。当社独自のエレクトロポレーション技術は、ワークフローの簡素化に加えて、Neon NxTピペットチップでトランスフェクションが行われるため、従来のエレクトロポレーションシステムと比較してプロセス全体を短縮し、分注ステップ数を大幅に削減します。
8チャンネルピペットは、より高いスループット維持性能を提供します
Neon NxT 8チャンネルピペットで、柔軟性をかつてないレベルに高めます。8チャンネルピペットの各チップは独立したチューブ内で独立して動作するため、チップごとにさまざまなエレクトロポレーションパラメーター、再懸濁バッファー、デリバリーペイロード、さらには細胞タイプを使用できます。さらに、Neon NxT 8チャンネルピペットおよびステーションは、既存のNeon NxT装置で機能し、同じNeon NxTチップとバッファーを活用できます。条件を最適化する場合でも、複数の変数を探索する場合でも、Neon NxT 8チャンネルピペットは研究を加速し、より信頼性の高い結果を得るために必要な汎用性を備えています。
最適化を最大化する柔軟性
Neon NxT 8チャンネルピペットでは、各チャンネルを異なる条件にすることができ、1回の実験で幅広いパラメーターを効率的にテストでき、研究のスループットと精度が大幅に向上します。この合理化されたアプローチにより、迅速かつ正確な最適化が可能になり、実験の高い効率と生存率が確保されます（図4）。
図4.Neon NxTトランスフェクションプログラム最適化研究。Jurkat細胞を用いた11.5 kb GFPプラスミドトランスフェクションに最適なエレクトロポレーションプログラムと再懸濁バッファーを評価しました。特定のエレクトロポレーションプログラムを表す各データポイントは、エレクトロポレーション後24時間でGFP陽性細胞の生細胞トランスフェクション細胞の総数（TVTC）に対する割合を示しています。赤色の丸は、最適な条件を示しており、Tバッファーを使用して最大85%のトランスフェクション効率を達成しています。
時間を節約できるプレートセットアップ
クイックスタートでサンプルごとのエレクトロポレーションパラメーターを調整する代わりに、Neon NxTエレクトロポレーションシステムの直感的なユーザーインターフェースを使用して、事前にプレート全体をセットアップすることができます。各サンプルをエレクトロポレーションする際に、画面上で進行状況をモニタリングし、Neon NxT 8チャンネルピペットにより最大96個のサンプルを15分以内にエレクトロポレーションします。
独自のコンパクトなエレクトロポレーション装置設計により、貴重な細胞のサンプル移し替えのロスと汚染リスクを最小限に抑えます
サンプル移し替え時のロスを最小限に抑制
サンプルは貴重ですが、従来のエレクトロポレーションキュベットとの間での移し替え中に一部の容量が失われることは避けられません。Neon NxTエレクトロポレーションシステムでのエレクトロポレーションは、ピペットチップ内で起こり、サンプルロスと細胞が受けるせん断力を最小限に抑えます。
最小限のサンプル汚染
パルス生成器やピペットステーションなどのNeon NxTシステムのコンパクトな設置面積は、ほとんどのバイオ安全キャビネット（BSC）に適合するほど小型です。サンプルは機器の使用中は常に無菌領域内にあるため、貴重な細胞の汚染リスクを低減できます。Neon NxTシステムには、BSCで簡単に使用できる新しいケーブル管理機能もあります。
図をクリックして拡大
図5.Neon NxTエレクトロポレーションシステムのサイズ。
Neon NxT Electroporation SystemとNeon Transfection Systemの仕様比較
| 仕様 |  Neon NxT Electroporation System |  Neon Transfection System |
|---|---|---|
| ピペットタイプ | 1チャンネルおよび8チャンネルオプション | 1チャンネルのみ |
| エレクトロポレーション容量 | 10 µLまたは100 µL | 10 µLまたは100 µL |
| エレクトロポレーションバッファー容量* | 2 mL | 3 mL |
| チップ取り付け | ClipTip技術 | 摩擦 |
| エレクトロポレーションパルス | 1～10 | 1～10 |
| パルス間隔 | 1～100 ms | 1～100 ms |
| パルス電圧 | 500～2,500 V | 500～2,500 V |
| アーク検出 | あり | なし |
| クラウド接続 | 可 | 不可 |
| パルス生成器の寸法** | 9.5 x 7.6 x 9.9インチ（幅 x 高さ x 奥行） 11.9 lb（5.4 kg） | 9.5 x 8.9 x 13.6インチ（幅 x 高さ x 奥行） 13.8 lb（6.25 kg） |
| ケーブル管理機能*** | あり | なし |
| タッチスクリーン | 8インチ容量タッチスクリーン | 7インチタッチスクリーン |
| 電気定格 | 100～240 VAC、270 W | 100～240 C、150 W |
*Neon NxTエレクトロポレーションシステムのバッファーチューブには、2 mLレベルインジケータが付いています。
**Neon NxTパルスジェネレータは、シャッターを取り外さずに、一般的なBSCに出入りすることができます。
***取り付け可能なケーブルオーガナイザを使用して、余分なケーブル長をNeon NxTシステムの背後に固定できます。
NeonTransfection Systemと同じ技術と性能
図6.Neon NxT Electroporation SystemおよびNeon Transfection Systemの性能。性能は、さまざまな哺乳類細胞株をGFPプラスミドDNAまたはGFP mRNAでトランスフェクションすることで評価しました。（A） GFPプラスミドDNAのトランスフェクション効率は、GFP陽性細胞の割合として報告されています。（B） GFPプラスミドDNAによるトランスフェクション後の細胞の生存率。（C） GFP mRNAトランスフェクション効率は、GFP陽性細胞の割合として報告した。（D） GFP mRNAを用いたトランスフェクション後の細胞の生存率。
細胞治療製造用Gibco CTS Xenon Electroporation System
閉鎖系で拡張性の高い、cGMP準拠の細胞治療製造向けエレクトロポレーションシステム。CTS Xenonシステムは、Neon NxT Transfection Systemとプロセスおよびプロトコルの互換性があり、研究からプロセス開発、最大25 mLの商用製造までスムーズなスケールアップが可能です。
リソース
ドキュメント
トランスフェクションのプロトコルおよび引用
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