实验方案
您可以通过以下程序准确测定细胞存活率。细胞存活率计算方法为血细胞计数器网格内的活细胞数量除以细胞总数。如果细胞吸收了台盼蓝,则认为其无活性。
- 使用血细胞计数器确定细胞系悬液的细胞密度。
- 使用 pH 7.2-7.3 的缓冲等渗盐溶液(即磷酸盐缓冲液)制备 0.4% 台盼蓝溶液。
- 向 0.1 mL 细胞中加入 0.1 mL 台盼蓝储备液。
- 装入血细胞计数器,并立即在低倍显微镜下检查。
- 对染成蓝色的细胞和总细胞进行计数。健康对数期培养物的细胞存活率至少应为 95%。
活细胞 % = [1.00 – (蓝色细胞数÷总细胞数)] × 100
要计算每 mL 培养物的活细胞数,请使用以下公式。请记住校正稀释因子。
活细胞数量 × 104 × 1.1 = 细胞/mL 培养物