組織や細胞からのRNA抽出は、細胞を溶解して全核酸を遊離するプロセスから始まります。サーモフィッシャーサイエンティフィックのRNA抽出試薬とキットは、培養細胞や組織サンプルから始める場合でも、植物、細菌、哺乳類細胞から始める場合でも、お客様の研究に最適な製品を提供します。サーモフィッシャーサイエンティフィックには、信頼性の高いTRIzol試薬やPureLink精製キットなどの従来のInvitrogen製品のほか、Cells-to-CT、MagMAX、RNAlater kitおよび試薬などの優れた製品があります。

RNA単離の基礎をご覧ください

動画：組織や細胞からRNAを抽出する方法

RNAサンプルの保存および安定化

RNAlater溶液は、インタクトの動物組織、器官、細胞、および細菌中のRNAの保存に広く使用されています。RNAを単離するためにサンプルを直ちに処理したり、後で処理するために液体窒素で凍結したりする必要がありません。

RNAlaterソリューションを注文する
安定化と保管のためのRNAlater

組織サンプルからのRNA抽出

組織サンプルからRNAを抽出するには、特定の組織からRNA分子を分離および精製します。この方法では組織サンプルを回収する必要があり、生検や外科的処置などのさまざまな手法で入手できます。次に、組織をホモジナイズして、細胞を破壊し、RNAを放出します。抽出されたRNAには、組織内に存在するさまざまな細胞タイプの混合物が含まれている場合があり、RNA組成にばらつきが生じる可能性があります。したがって、組織サンプルのタイプとサイズを慎重に選択し、目的の細胞集団を確実に表すことが重要です。

選択ガイド：組織からRNAを単離するためのキット

 今すぐ注文今すぐ注文今すぐ注文今すぐ注文今すぐ注文今すぐ注文今すぐ注文
 高純度でインタクトなRNAのゴールドスタンダードシンプルで信頼性の高い迅速なメソッド96サンプル用の高速で便利なカラムベースのフィルタープレートフォーマット（RNA >200 nt）限られたサンプル量から迅速で便利なカラムベースのメソッド（RNA >200 nt）小型RNA種の迅速で便利な方法最高純度のTRIzol+カラム精製で、沈殿は不要ですHTPフォーマットで、あらゆるサイズのRNA（microRNAを含む）を回収できます
  TRIzol ReagentPureLink RNA MiniキットPureLink Pro 96トータルRNA精製キットPureLink RNAマイクロスケールキットmirVana miRNA Isolation KitTRIzol Plus RNA Purification SystemMagMAX mirVana Total RNA Isolation
Top seller✓      
分離方法高純度有機抽出（アルコール沈殿が必要）迅速簡便なシリカカラム迅速フィルタープレートフォーマットの便利なシリカカラム迅速で便利なマイクロシリカカラム有機抽出と便利なシリカカラムの組み合わせ最高の純度と利便性。有機抽出とシリカカラムの両方を含みます（沈殿不要）大容量化可能でフレキシブルな磁気ビーズ法
調製時間1時間20分20分20分30分1時間<1時間
開始物質の量最大100 mg10 mg～100 mg10細胞～10 mg最大10 mg最大250 mgの組織最大100 mg最大50 mg
ハイスループット対応  ✓
   ✓
調製サイズ100回分50回分96回分50回分96回分50回分96回分

組織からRNAを抽出する方法

  1. 組織サンプルを採取し、直ちに液体窒素で急速凍結するか、-80℃で保存用に保管します。
  2. あらかじめ冷却した乳鉢と乳棒またはホモジナイザーを使用して、組織サンプルを細かい粉末に粉砕します。
  3. サンプルサイズに基づいて推奨容量に従い、TRIzolまたは他のRNA抽出試薬を組織サンプルのチューブに追加します。ボルテックスして細胞を溶解します。
  4. チューブを室温で5分間インキュベートします。
  5. 同じ容量でチューブにクロロホルムを加えます。15秒間、よく振り混ぜてください。
  6. チューブを高速（12,000～16,000 x g）で4℃で15分間遠心分離します。
  7. 中間相および有機相を避けながら、上部の水相を新しいチューブに移します。
  8. チューブに等量のイソプロパノールを加え、穏やかに混合します。室温で10分間インキュベートします。
  9. 高速で4℃で10分間遠心分離し、RNAをペレット化します。
  10. 上清を除去し、RNAペレットを75%エタノールで洗浄し、4°Cで5分間再度遠心分離します
  11.  エタノールを除去し、RNAペレットを短時間空気乾燥し、RNaseフリーの水または適切なバッファーに溶解します。ゲノムDNA汚染を除去するオプションとして、このステップでRNAサンプルをDNase Iで処理します。
  12. RNAを分解から保護するためにRNase阻害剤を添加し、RNAサンプルを-80°Cで保存するか、ダウンストリームアプリケーションで使用します。

注：このプロトコルでは、TRIzolまたは同様の試薬を使用した組織からのRNA抽出プロセスの基本的な概要を提供します。詳細なガイドラインと安全上の注意事項については、試薬に付属の具体的な説明書を参照することが重要です。

組織からRNAを抽出するためのリソース

細胞からのRNA抽出

細胞からのRNA抽出は、培養細胞または細胞懸濁液から特異的にRNAを単離するプロセスです。この方法には、酵素的に細胞膜を分解して、RNAなどの細胞内容物を放出することが含まれます。組織サンプルとは異なり、細胞培養ではより均質な細胞集団が得られるため、その集団内の遺伝子発現をより特異的に分析できます。さらに、細胞培養は制御された条件下で操作および処理できるため、さまざまな実験介入がRNA発現に与える影響を研究しやすくなります。

Cells-to-CTキットを使用して、細胞からqPCR結果を数分で取得

最初にRNAを単離することなく、培養細胞ライセートを分析することもできます。qPCRの結果は、精製したRNAと同等または場合によってはそれ以上の結果を得ることができます。Cells-to-CTおよびSingle Cell-to-CT製品ラインなどのInvitrogen製品は、優れた性能と取り扱いの利点を提供します。

Cells-to-CTキットの詳細を見る
Cells-to-CTキットを今すぐ注文してください

RNAは細胞から抽出できますか？

はい、RNAは細胞から抽出できます。このプロセスは、通常、培養細胞は均一な細胞集団であり、組織はより不均一であり、多くの細胞集団と細胞外マトリックスを含んでいるため、組織サンプルからRNAを抽出すると比較してわずかに異なります。

細胞培養選択ガイドからのRNA単離

 今すぐ注文今すぐ注文今すぐ注文今すぐ注文今すぐ注文今すぐ注文
 高純度で完全なRNARNA>（200 nt）用の高速で便利なカラムベースのフォーマット96サンプル用の高速で便利なカラムベースのフィルタープレートフォーマット（RNA >200 nt）限られたサンプル量から迅速で便利なカラムベースのメソッド（RNA >200 nt）スモールRNA種の迅速で便利な方法RNA精製なしでqRT-PCRへの細胞用の完全なシステム
 TRIzol ReagentPureLink RNA MiniキットPureLink Pro 96トータルRNA精製キットPureLink RNAマイクロスケールキットMirVana miRNA Isolation KitCells-to-CTキット
Top seller✓
✓
  ✓
✓
調製時間1時間20分20分20分30分<10分
細胞溶解法高純度有機抽出（アルコール沈殿が必要）無毒性グアニジンイソチオシアン酸塩の溶解無毒性グアニジンイソチオシアン酸塩の溶解無毒性グアニジンイソチオシアン酸塩の溶解有機抽出の後にアルコール沈殿Cells-to-CT溶解
開始物質の量最高1x107細胞5x106～1x108細胞5x106～1x108細胞最高1x105細胞102～107培養細胞10～100,000細胞
アプリケーションすべてのRNA発現法qRT-PCR、NGSqRT-PCR、NGSqRT-PCR、NGSMicro RNA解析qRT-PCR

細胞培養からRNAを単離するためのリソース

FFPE RNA抽出

ホルマリン固定パラフィン包埋（FFPE）サンプルからRNAを抽出することは、分子生物学研究において重要な技術です。FFPEサンプルは貴重なアーカイブ組織標本を提供するため、臨床および病理学的研究で一般的に使用されます。しかし、FFPEサンプルの保存プロセスはRNAの著しい分解やクロスリンクを引き起こす可能性があるため、抽出プロセスを困難にしています。

FFPEサンプルからRNAを抽出する方法には、いくつかの重要なステップがあります。 

  • まず、有機溶剤を使用してパラフィンワックスを除去することにより、FFPE組織切片を脱パラフィン化します。 
  • 次に、組織を再水和し、プロテイナーゼKで処理して、タンパク質を消化し、架橋を逆にします。 
  • その後、カラムベースの精製やフェノールクロロホルム抽出など、さまざまな方法を使用してRNAを抽出します。 
  • 最後に、抽出されたRNAを分光光度法や電気泳動などの手法を使用して品質と量を評価します。

FFPEサンプル中のRNAの分解やクロスリンクが発生する可能性があるため、抽出されたRNAは最高品質ではない場合があります。そのため、RNAの完全性を慎重に評価し、RT-qPCRやRNAシーケンシングなどの分解RNA用に特別に設計された方法の使用を検討することが不可欠です。 

FFPE組織から単離されたRNAの全体的な品質と収量に影響を与える可能性のあるいくつかの要因があります。FFPEサンプルを扱う際の推奨事項をまとめたものです。

  1. 上流組織の調達および組織試料の調製—可能であれば、外科的切除から1時間以内に組織を固定する必要があります。固定プロセスが完了する前に、RNAの大幅な分解が発生する可能性があります。最適な固定時間は12～24時間で、中性緩衝ホルマリンまたはパラホルムアルデヒドを使用します。固定組織は、包埋プロセスの前に完全に脱水する必要があります。
  2. ブロックの保管—可能な場合、切断面のないブロックを保管することで、大気中の酸素、水、および光や侵入(真菌、昆虫など)などの環境要因にさらされることによる継続的な損傷を防ぎます。
  3. RNA単離に使用する組織の種類、サイズ、および量—推奨される組織厚は10～20 µmです。使用するセクションの数は、組織の種類（細胞密度に影響する）および表面積（推奨サイズ：50～300 mm2）。出発物質が過剰な場合、フィルターの目詰まりを引き起こし、収率が低下する可能性があります。
  4. 組織の包埋に使用する過剰量のパラフィン—可能な場合は、精製プロトコルを開始する前に過剰なパラフィンを除去する必要があります。キシレンベースの精製法では、完全な脱パラフィンを行うには、室温での2回のキシレン処理で十分である必要があります。必要に応じて、より厳格な37～55℃処理を最大30分間実施できます。キシレン脱パラフィン処理後、100%エタノールを完全に除去し、2回の100%エタノール洗浄後にペレットを乾燥させることが重要です。磁気ビーズ法では、入力を20 µm切片に制限するパラフィンを処理するために、新しい化学的特性を採用しています。

FFPE RNA単離キット選択ガイド

 今すぐ注文今すぐ注文
 同じFFPE切片からRNAとDNAを低スループットで単離します同じFFPE切片からRNAとDNAを拡張可能に単離
  RecoverAll Total Nucleic Acid Isolation Kit for FFPEMagMAX FFPE DNA/RNA Ultra Kit
調製時間4.5時間（16サンプルの総時間）
操作時間2.5時間		4時間（96回分の調製にかかる合計時間）
操作時間1時間
Final product extractedトータルRNA、microRNA、gDNAトータルRNA、microRNA、gDNA
分離方法カラム精製磁気ビーズ精製
脱パラフィンが必要です✓
✓
自動化対応（脱パラフィン後） ✓
（KingFisher FlexおよびDuo Primeのスクリプト）
適合するFFPEサンプル範囲最大4 x 20ミクロンの切片
（300 mm2組織）		最大2 x 20ミクロンの切片
（300 mm2組織）
サンプル量約50 µLの精製DNA
約50 µLの精製RNA		約50 µLの精製DNA
約50 µLの精製RNA
Ion AmpliSeq DNAパネル（例：Cancer Hotspot Panel v2）と互換性があります✓✓
Ion AmpliSeq RNAパネル（RNAがんやRNA融合など）と互換性があります✓✓

FFPE RNA抽出リソース

植物RNA抽出キット

植物RNAの抽出には、細胞壁を破壊するための組織のホモジナイゼーション、細胞成分を可溶化するための抽出試薬による処理、汚染物質の除去、抽出RNAの精製など、いくつかの重要なステップが含まれます。植物サンプルからRNAを抽出する方法では、硬質の細胞壁が存在し、二次代謝物が高レベルであるために、特有の課題があります。 

植物RNA単離は、植物サンプルからトータルRNAを精製するのに役立ちます

植物RNAの単離における大きな問題の1つは、ポリフェノール化合物や多糖類などの生体分子の存在です。Invitrogen Plant RNA Isolation Aidは、ポリフェノールや多糖類と結合する高分子量ポリマーであるポリビニルピロリドンを添加し、抽出前のスピンステップを追加することで、これらの汚染物質の多くを最小限に抑えます。

Plant RNA Isolation Aidを注文する

植物RNA抽出キット選択ガイド

 今すぐ注文今すぐ注文今すぐ注文今すぐ注文
 困難なサンプルに適しています(針葉樹の組織＆種子)高速かつ取り扱いが容易マイクロRNA ＆ small RNAを効率的に回収高速＆完全自動化
  植物RNA用の試薬 PureLink RNA MiniキットmirVana miRNA Isolation KitMagMAX-96 Total RNA Isolation Kit
Top seller  ✓ 
単離されたRNAタイプ大きなRNA分子のみ大きなRNA分子のみ小さい＆大きいRNA分子大きなRNA分子のみ
調製時間60分<20分30分<45分
開始物質の量最大1 g<250 mg0.5～250 mg最大10 mg
分離方法高純度有機抽出（アルコール沈殿が必要）迅速簡便なシリカカラム最高の純度&と利便性。有機抽出&とシリカカラムの両方を含みます（沈殿不要）。大容量化可能でフレキシブルな磁気ビーズ法
ハイスループット対応   ✓

植物RNA分離リソース

血液RNA抽出キット

培養細胞や組織サンプルとは異なり、血液サンプルからRNAを抽出するには、血液細胞からRNAを放出させるために、細胞の分離と溶解のための追加ステップが必要になります。さらに、血液サンプルには赤血球、血小板、白血球のさまざまなサブセットなど、さまざまな種類の細胞が含まれている場合があり、RNA組成にばらつきが生じる可能性があります。そのため、RNA抽出を確実に成功させるには、特定の血液サンプルと適切なプロトコルを慎重に検討する必要があります。

血液サンプルからのRNA抽出には、いくつかの重要なステップが含まれます。まず、血液サンプルを採取して処理し、白血球を含む細胞分画を血漿または血清から分離します。その後、細胞分画を溶解してRNAを放出し、ライセートを試薬で処理し、RNAを安定化させ分解から保護します。RNA抽出キットは、カラムベースの精製やフェノールクロロホルム抽出などの方法を利用して、血液細胞からRNAを分離します。

血液RNA抽出キット選択ガイド

 今すぐ注文今すぐ注文今すぐ注文今すぐ注文今すぐ注文今すぐ注文
特長Optimized for liquid samples専用キットによる非核赤血球の除去HTPニーズに対応する、96カラムのフィルタープレートフォーマットHTPは安定化した血液サンプルからの精製に最適化されていますHTPフォーマットで、あらゆるサイズのRNA（microRNAを含む）を回収できます全血から直接RNA収量が高いため、白血球を単離する必要はありません
 TRIzol LS PureLink Total RNA Blood KitPureLink Pro 96トータルRNA精製キット安定化した血液チューブRNA単離キット用MagMAXMagMAX mirVana Total RNA Isolation RiboPure Blood Kit
Top seller     ✓
適合する安定化試薬EDTA、ヘパリン、クエン酸塩、RNAlaterEDTA、ヘパリン、クエン酸塩EDTA、ヘパリン、クエン酸塩TempusまたはPaxGeneチューブEDTAまたはクエン酸塩EDTA、ヘパリン、クエン酸塩、RNAlater
安定化試薬が付属     ✓
RNAlater
分離方法高純度有機抽出（アルコール沈殿が必要）迅速簡便なシリカカラムプレートフォーマットの高速で便利なシリカカラム大容量化可能でフレキシブルな磁気ビーズ法大容量化可能でフレキシブルな磁気ビーズ法最高純度の&利便性有機抽出&シリカカラムの両方を含有（沈殿不要）
調製時間1時間20分10-40分2時間でチューブ12本96 samples in <1 hr30分
ハイスループット対応  ✓✓✓ 

RNA抽出用採血チューブ

Tempus Blood RNA Tubesは、ダウンストリームアッセイで使用できるトータルRNAを、全血の収集時点で安定化および精製するのに使用できます。各Tempusチューブは安定化および溶解試薬を含んでおり、その後の赤血球溶解やプロテイナーゼK処理を不要にします。RNA安定化試薬はRNaseを不活性化し、RNAを選択的に沈降させます。RNAがペレット化されると、Tempusチューブに保存された血液サンプルの上清からゲノムDNAを分離することもできます。 

血液からRNAを単離するためのリソース

酵母からRNAを単離

培養細胞や組織サンプルとは異なり、酵母サンプルからのRNA抽出は、植物細胞の細胞壁や動物組織の細胞-細胞結合などの複雑な細胞構造がないため、比較的簡単です。さらに、酵母サンプルは通常均一な細胞集団を含むため、抽出プロセスを簡素化し、RNA組成のばらつきを低減できます。 

酵母サンプルからRNAを抽出する方法は、3つの簡単なステップで構成されます。1）酵母細胞を回収し、溶解し、酵素消化または機械的破壊によりRNAを放出する。2）ライセートを抽出試薬で処理して細胞成分を可溶化し、RNAを分解から保護する。3）カラムベースの精製またはフェノールクロロホルム抽出でRNAを抽出する。 

酵母RNA単離選択ガイド

 今すぐ注文今すぐ注文今すぐ注文今すぐ注文
 高速＆完全自動化高速かつ取り扱いが容易発現プロファイルを維持しながら、硬質な酵母細胞壁用に設計されています迅速で便利なカラムベース、96サンプル用フィルタープレートフォーマット（RNA >20 0nt）
 マイクロアレイ用Platinum Taq MagMAXトータルRNA単離キットPureLink RNA MiniキットRiboPure酵母キットPureLink Pro 96トータルRNA精製キット
Top seller ✓  
細胞溶解用の特殊ビーズが付属しています無し無しジルコニアビーズNo
分離方法有機抽出および磁気ビーズを含み、最高純度を実現するスケーラブルで柔軟なフォーマット迅速簡便なシリカカラム最高の純度と利便性。有機抽出とシリカカラムの両方を含みます96ウェルフィルタープレートフォーマットの高速で便利なシリカカラム
調製時間<1時間20分90分（DNase処理を含む）20分
開始物質の量最高1x106細胞最高1x108細胞最高3x108細胞1.8 mLの新鮮な対数期の酵母細胞（OD660=0.6～0.8）
ハイスループット対応✓   
キット容量96回分50回分50回分96回分

酵母RNA単離リソース

細菌RNA抽出

細菌サンプルからRNAを抽出することは、複雑な細胞構造を持たないため、培養細胞や組織サンプルと比較して比較的簡単です。細菌サンプルには通常、均一な細胞集団が含まれているため、RNA抽出プロセスを簡素化し、ヘルプピンは RNA組成のばらつきを誘引します。さらに、細菌サンプルでは、汚染されたDNAを除去し、純粋なRNAサンプルを得るための酵素処理などの追加のステップが必要になる場合があります。

酵母サンプルでのRNA単離と同様に、細菌サンプルからRNAを抽出する方法には3つの簡単なステップがあります。1）細菌細胞を回収し、溶解し、酵素消化、機械的破壊、または化学的溶解によりRNAを放出します。2）ライセートを抽出試薬で処理することで細胞成分を可溶化し、RNAを分解から保護します。3）カラムベースの精製またはフェノールクロロホルム抽出でRNAを抽出します。 

選択ガイド：細菌RNA抽出キット

 今すぐ注文今すぐ注文今すぐ注文今すぐ注文
 溶解手順はありません迅速＆簡便なプロトコル、20分迅速で便利なシリカカラムベースのフィルタープレートフォーマットHTP対応、45分
 TRIzol Max細菌RNA単離キット  PureLink RNA MiniキットPureLink Pro 96トータルRNA精製キットMagMAX Total Nucleic Acid Isolation Kit
Top seller ✓  
細胞溶解用の特殊ビーズが付属しています無し無し無しジルコニアビーズ
分離方法高純度有機抽出（アルコール沈殿が必要）迅速簡便なシリカカラム96ウェルフィルタープレートフォーマットの高速で便利なシリカカラム大容量化可能でフレキシブルな磁気ビーズ法
調製時間1時間20分20分45分
開始物質の量最高1x108細胞最高1x109細胞最大1x109細胞最大0.3 gの固体サンプルまたは175 µLの液体サンプル
ハイスループット対応  ✓✓
キット容量100回分50回分96回分100回分

細菌RNA単離リソース

組織

組織サンプルからのRNA抽出

組織サンプルからRNAを抽出するには、特定の組織からRNA分子を分離および精製します。この方法では組織サンプルを回収する必要があり、生検や外科的処置などのさまざまな手法で入手できます。次に、組織をホモジナイズして、細胞を破壊し、RNAを放出します。抽出されたRNAには、組織内に存在するさまざまな細胞タイプの混合物が含まれている場合があり、RNA組成にばらつきが生じる可能性があります。したがって、組織サンプルのタイプとサイズを慎重に選択し、目的の細胞集団を確実に表すことが重要です。

選択ガイド：組織からRNAを単離するためのキット

 今すぐ注文今すぐ注文今すぐ注文今すぐ注文今すぐ注文今すぐ注文今すぐ注文
 高純度でインタクトなRNAのゴールドスタンダードシンプルで信頼性の高い迅速なメソッド96サンプル用の高速で便利なカラムベースのフィルタープレートフォーマット（RNA >200 nt）限られたサンプル量から迅速で便利なカラムベースのメソッド（RNA >200 nt）小型RNA種の迅速で便利な方法最高純度のTRIzol+カラム精製で、沈殿は不要ですHTPフォーマットで、あらゆるサイズのRNA（microRNAを含む）を回収できます
  TRIzol ReagentPureLink RNA MiniキットPureLink Pro 96トータルRNA精製キットPureLink RNAマイクロスケールキットmirVana miRNA Isolation KitTRIzol Plus RNA Purification SystemMagMAX mirVana Total RNA Isolation
Top seller✓      
分離方法高純度有機抽出（アルコール沈殿が必要）迅速簡便なシリカカラム迅速フィルタープレートフォーマットの便利なシリカカラム迅速で便利なマイクロシリカカラム有機抽出と便利なシリカカラムの組み合わせ最高の純度と利便性。有機抽出とシリカカラムの両方を含みます（沈殿不要）大容量化可能でフレキシブルな磁気ビーズ法
調製時間1時間20分20分20分30分1時間<1時間
開始物質の量最大100 mg10 mg～100 mg10細胞～10 mg最大10 mg最大250 mgの組織最大100 mg最大50 mg
ハイスループット対応  ✓
   ✓
調製サイズ100回分50回分96回分50回分96回分50回分96回分

組織からRNAを抽出する方法

  1. 組織サンプルを採取し、直ちに液体窒素で急速凍結するか、-80℃で保存用に保管します。
  2. あらかじめ冷却した乳鉢と乳棒またはホモジナイザーを使用して、組織サンプルを細かい粉末に粉砕します。
  3. サンプルサイズに基づいて推奨容量に従い、TRIzolまたは他のRNA抽出試薬を組織サンプルのチューブに追加します。ボルテックスして細胞を溶解します。
  4. チューブを室温で5分間インキュベートします。
  5. 同じ容量でチューブにクロロホルムを加えます。15秒間、よく振り混ぜてください。
  6. チューブを高速（12,000～16,000 x g）で4℃で15分間遠心分離します。
  7. 中間相および有機相を避けながら、上部の水相を新しいチューブに移します。
  8. チューブに等量のイソプロパノールを加え、穏やかに混合します。室温で10分間インキュベートします。
  9. 高速で4℃で10分間遠心分離し、RNAをペレット化します。
  10. 上清を除去し、RNAペレットを75%エタノールで洗浄し、4°Cで5分間再度遠心分離します
  11.  エタノールを除去し、RNAペレットを短時間空気乾燥し、RNaseフリーの水または適切なバッファーに溶解します。ゲノムDNA汚染を除去するオプションとして、このステップでRNAサンプルをDNase Iで処理します。
  12. RNAを分解から保護するためにRNase阻害剤を添加し、RNAサンプルを-80°Cで保存するか、ダウンストリームアプリケーションで使用します。

注：このプロトコルでは、TRIzolまたは同様の試薬を使用した組織からのRNA抽出プロセスの基本的な概要を提供します。詳細なガイドラインと安全上の注意事項については、試薬に付属の具体的な説明書を参照することが重要です。

組織からRNAを抽出するためのリソース

培養細胞

細胞からのRNA抽出

細胞からのRNA抽出は、培養細胞または細胞懸濁液から特異的にRNAを単離するプロセスです。この方法には、酵素的に細胞膜を分解して、RNAなどの細胞内容物を放出することが含まれます。組織サンプルとは異なり、細胞培養ではより均質な細胞集団が得られるため、その集団内の遺伝子発現をより特異的に分析できます。さらに、細胞培養は制御された条件下で操作および処理できるため、さまざまな実験介入がRNA発現に与える影響を研究しやすくなります。

Cells-to-CTキットを使用して、細胞からqPCR結果を数分で取得

最初にRNAを単離することなく、培養細胞ライセートを分析することもできます。qPCRの結果は、精製したRNAと同等または場合によってはそれ以上の結果を得ることができます。Cells-to-CTおよびSingle Cell-to-CT製品ラインなどのInvitrogen製品は、優れた性能と取り扱いの利点を提供します。

Cells-to-CTキットの詳細を見る
Cells-to-CTキットを今すぐ注文してください

RNAは細胞から抽出できますか？

はい、RNAは細胞から抽出できます。このプロセスは、通常、培養細胞は均一な細胞集団であり、組織はより不均一であり、多くの細胞集団と細胞外マトリックスを含んでいるため、組織サンプルからRNAを抽出すると比較してわずかに異なります。

細胞培養選択ガイドからのRNA単離

 今すぐ注文今すぐ注文今すぐ注文今すぐ注文今すぐ注文今すぐ注文
 高純度で完全なRNARNA>（200 nt）用の高速で便利なカラムベースのフォーマット96サンプル用の高速で便利なカラムベースのフィルタープレートフォーマット（RNA >200 nt）限られたサンプル量から迅速で便利なカラムベースのメソッド（RNA >200 nt）スモールRNA種の迅速で便利な方法RNA精製なしでqRT-PCRへの細胞用の完全なシステム
 TRIzol ReagentPureLink RNA MiniキットPureLink Pro 96トータルRNA精製キットPureLink RNAマイクロスケールキットMirVana miRNA Isolation KitCells-to-CTキット
Top seller✓
✓
  ✓
✓
調製時間1時間20分20分20分30分<10分
細胞溶解法高純度有機抽出（アルコール沈殿が必要）無毒性グアニジンイソチオシアン酸塩の溶解無毒性グアニジンイソチオシアン酸塩の溶解無毒性グアニジンイソチオシアン酸塩の溶解有機抽出の後にアルコール沈殿Cells-to-CT溶解
開始物質の量最高1x107細胞5x106～1x108細胞5x106～1x108細胞最高1x105細胞102～107培養細胞10～100,000細胞
アプリケーションすべてのRNA発現法qRT-PCR、NGSqRT-PCR、NGSqRT-PCR、NGSMicro RNA解析qRT-PCR

細胞培養からRNAを単離するためのリソース

FFPE

FFPE RNA抽出

ホルマリン固定パラフィン包埋（FFPE）サンプルからRNAを抽出することは、分子生物学研究において重要な技術です。FFPEサンプルは貴重なアーカイブ組織標本を提供するため、臨床および病理学的研究で一般的に使用されます。しかし、FFPEサンプルの保存プロセスはRNAの著しい分解やクロスリンクを引き起こす可能性があるため、抽出プロセスを困難にしています。

FFPEサンプルからRNAを抽出する方法には、いくつかの重要なステップがあります。 

  • まず、有機溶剤を使用してパラフィンワックスを除去することにより、FFPE組織切片を脱パラフィン化します。 
  • 次に、組織を再水和し、プロテイナーゼKで処理して、タンパク質を消化し、架橋を逆にします。 
  • その後、カラムベースの精製やフェノールクロロホルム抽出など、さまざまな方法を使用してRNAを抽出します。 
  • 最後に、抽出されたRNAを分光光度法や電気泳動などの手法を使用して品質と量を評価します。

FFPEサンプル中のRNAの分解やクロスリンクが発生する可能性があるため、抽出されたRNAは最高品質ではない場合があります。そのため、RNAの完全性を慎重に評価し、RT-qPCRやRNAシーケンシングなどの分解RNA用に特別に設計された方法の使用を検討することが不可欠です。 

FFPE組織から単離されたRNAの全体的な品質と収量に影響を与える可能性のあるいくつかの要因があります。FFPEサンプルを扱う際の推奨事項をまとめたものです。

  1. 上流組織の調達および組織試料の調製—可能であれば、外科的切除から1時間以内に組織を固定する必要があります。固定プロセスが完了する前に、RNAの大幅な分解が発生する可能性があります。最適な固定時間は12～24時間で、中性緩衝ホルマリンまたはパラホルムアルデヒドを使用します。固定組織は、包埋プロセスの前に完全に脱水する必要があります。
  2. ブロックの保管—可能な場合、切断面のないブロックを保管することで、大気中の酸素、水、および光や侵入(真菌、昆虫など)などの環境要因にさらされることによる継続的な損傷を防ぎます。
  3. RNA単離に使用する組織の種類、サイズ、および量—推奨される組織厚は10～20 µmです。使用するセクションの数は、組織の種類（細胞密度に影響する）および表面積（推奨サイズ：50～300 mm2）。出発物質が過剰な場合、フィルターの目詰まりを引き起こし、収率が低下する可能性があります。
  4. 組織の包埋に使用する過剰量のパラフィン—可能な場合は、精製プロトコルを開始する前に過剰なパラフィンを除去する必要があります。キシレンベースの精製法では、完全な脱パラフィンを行うには、室温での2回のキシレン処理で十分である必要があります。必要に応じて、より厳格な37～55℃処理を最大30分間実施できます。キシレン脱パラフィン処理後、100%エタノールを完全に除去し、2回の100%エタノール洗浄後にペレットを乾燥させることが重要です。磁気ビーズ法では、入力を20 µm切片に制限するパラフィンを処理するために、新しい化学的特性を採用しています。

FFPE RNA単離キット選択ガイド

 今すぐ注文今すぐ注文
 同じFFPE切片からRNAとDNAを低スループットで単離します同じFFPE切片からRNAとDNAを拡張可能に単離
  RecoverAll Total Nucleic Acid Isolation Kit for FFPEMagMAX FFPE DNA/RNA Ultra Kit
調製時間4.5時間（16サンプルの総時間）
操作時間2.5時間		4時間（96回分の調製にかかる合計時間）
操作時間1時間
Final product extractedトータルRNA、microRNA、gDNAトータルRNA、microRNA、gDNA
分離方法カラム精製磁気ビーズ精製
脱パラフィンが必要です✓
✓
自動化対応（脱パラフィン後） ✓
（KingFisher FlexおよびDuo Primeのスクリプト）
適合するFFPEサンプル範囲最大4 x 20ミクロンの切片
（300 mm2組織）		最大2 x 20ミクロンの切片
（300 mm2組織）
サンプル量約50 µLの精製DNA
約50 µLの精製RNA		約50 µLの精製DNA
約50 µLの精製RNA
Ion AmpliSeq DNAパネル（例：Cancer Hotspot Panel v2）と互換性があります✓✓
Ion AmpliSeq RNAパネル（RNAがんやRNA融合など）と互換性があります✓✓

FFPE RNA抽出リソース

植物

植物RNA抽出キット

植物RNAの抽出には、細胞壁を破壊するための組織のホモジナイゼーション、細胞成分を可溶化するための抽出試薬による処理、汚染物質の除去、抽出RNAの精製など、いくつかの重要なステップが含まれます。植物サンプルからRNAを抽出する方法では、硬質の細胞壁が存在し、二次代謝物が高レベルであるために、特有の課題があります。 

植物RNA単離は、植物サンプルからトータルRNAを精製するのに役立ちます

植物RNAの単離における大きな問題の1つは、ポリフェノール化合物や多糖類などの生体分子の存在です。Invitrogen Plant RNA Isolation Aidは、ポリフェノールや多糖類と結合する高分子量ポリマーであるポリビニルピロリドンを添加し、抽出前のスピンステップを追加することで、これらの汚染物質の多くを最小限に抑えます。

Plant RNA Isolation Aidを注文する

植物RNA抽出キット選択ガイド

 今すぐ注文今すぐ注文今すぐ注文今すぐ注文
 困難なサンプルに適しています(針葉樹の組織＆種子)高速かつ取り扱いが容易マイクロRNA ＆ small RNAを効率的に回収高速＆完全自動化
  植物RNA用の試薬 PureLink RNA MiniキットmirVana miRNA Isolation KitMagMAX-96 Total RNA Isolation Kit
Top seller  ✓ 
単離されたRNAタイプ大きなRNA分子のみ大きなRNA分子のみ小さい＆大きいRNA分子大きなRNA分子のみ
調製時間60分<20分30分<45分
開始物質の量最大1 g<250 mg0.5～250 mg最大10 mg
分離方法高純度有機抽出（アルコール沈殿が必要）迅速簡便なシリカカラム最高の純度&と利便性。有機抽出&とシリカカラムの両方を含みます（沈殿不要）。大容量化可能でフレキシブルな磁気ビーズ法
ハイスループット対応   ✓

植物RNA分離リソース

血液

血液RNA抽出キット

培養細胞や組織サンプルとは異なり、血液サンプルからRNAを抽出するには、血液細胞からRNAを放出させるために、細胞の分離と溶解のための追加ステップが必要になります。さらに、血液サンプルには赤血球、血小板、白血球のさまざまなサブセットなど、さまざまな種類の細胞が含まれている場合があり、RNA組成にばらつきが生じる可能性があります。そのため、RNA抽出を確実に成功させるには、特定の血液サンプルと適切なプロトコルを慎重に検討する必要があります。

血液サンプルからのRNA抽出には、いくつかの重要なステップが含まれます。まず、血液サンプルを採取して処理し、白血球を含む細胞分画を血漿または血清から分離します。その後、細胞分画を溶解してRNAを放出し、ライセートを試薬で処理し、RNAを安定化させ分解から保護します。RNA抽出キットは、カラムベースの精製やフェノールクロロホルム抽出などの方法を利用して、血液細胞からRNAを分離します。

血液RNA抽出キット選択ガイド

 今すぐ注文今すぐ注文今すぐ注文今すぐ注文今すぐ注文今すぐ注文
特長Optimized for liquid samples専用キットによる非核赤血球の除去HTPニーズに対応する、96カラムのフィルタープレートフォーマットHTPは安定化した血液サンプルからの精製に最適化されていますHTPフォーマットで、あらゆるサイズのRNA（microRNAを含む）を回収できます全血から直接RNA収量が高いため、白血球を単離する必要はありません
 TRIzol LS PureLink Total RNA Blood KitPureLink Pro 96トータルRNA精製キット安定化した血液チューブRNA単離キット用MagMAXMagMAX mirVana Total RNA Isolation RiboPure Blood Kit
Top seller     ✓
適合する安定化試薬EDTA、ヘパリン、クエン酸塩、RNAlaterEDTA、ヘパリン、クエン酸塩EDTA、ヘパリン、クエン酸塩TempusまたはPaxGeneチューブEDTAまたはクエン酸塩EDTA、ヘパリン、クエン酸塩、RNAlater
安定化試薬が付属     ✓
RNAlater
分離方法高純度有機抽出（アルコール沈殿が必要）迅速簡便なシリカカラムプレートフォーマットの高速で便利なシリカカラム大容量化可能でフレキシブルな磁気ビーズ法大容量化可能でフレキシブルな磁気ビーズ法最高純度の&利便性有機抽出&シリカカラムの両方を含有（沈殿不要）
調製時間1時間20分10-40分2時間でチューブ12本96 samples in <1 hr30分
ハイスループット対応  ✓✓✓ 

RNA抽出用採血チューブ

Tempus Blood RNA Tubesは、ダウンストリームアッセイで使用できるトータルRNAを、全血の収集時点で安定化および精製するのに使用できます。各Tempusチューブは安定化および溶解試薬を含んでおり、その後の赤血球溶解やプロテイナーゼK処理を不要にします。RNA安定化試薬はRNaseを不活性化し、RNAを選択的に沈降させます。RNAがペレット化されると、Tempusチューブに保存された血液サンプルの上清からゲノムDNAを分離することもできます。 

血液からRNAを単離するためのリソース

酵母

酵母からRNAを単離

培養細胞や組織サンプルとは異なり、酵母サンプルからのRNA抽出は、植物細胞の細胞壁や動物組織の細胞-細胞結合などの複雑な細胞構造がないため、比較的簡単です。さらに、酵母サンプルは通常均一な細胞集団を含むため、抽出プロセスを簡素化し、RNA組成のばらつきを低減できます。 

酵母サンプルからRNAを抽出する方法は、3つの簡単なステップで構成されます。1）酵母細胞を回収し、溶解し、酵素消化または機械的破壊によりRNAを放出する。2）ライセートを抽出試薬で処理して細胞成分を可溶化し、RNAを分解から保護する。3）カラムベースの精製またはフェノールクロロホルム抽出でRNAを抽出する。 

酵母RNA単離選択ガイド

 今すぐ注文今すぐ注文今すぐ注文今すぐ注文
 高速＆完全自動化高速かつ取り扱いが容易発現プロファイルを維持しながら、硬質な酵母細胞壁用に設計されています迅速で便利なカラムベース、96サンプル用フィルタープレートフォーマット（RNA >20 0nt）
 マイクロアレイ用Platinum Taq MagMAXトータルRNA単離キットPureLink RNA MiniキットRiboPure酵母キットPureLink Pro 96トータルRNA精製キット
Top seller ✓  
細胞溶解用の特殊ビーズが付属しています無し無しジルコニアビーズNo
分離方法有機抽出および磁気ビーズを含み、最高純度を実現するスケーラブルで柔軟なフォーマット迅速簡便なシリカカラム最高の純度と利便性。有機抽出とシリカカラムの両方を含みます96ウェルフィルタープレートフォーマットの高速で便利なシリカカラム
調製時間<1時間20分90分（DNase処理を含む）20分
開始物質の量最高1x106細胞最高1x108細胞最高3x108細胞1.8 mLの新鮮な対数期の酵母細胞（OD660=0.6～0.8）
ハイスループット対応✓   
キット容量96回分50回分50回分96回分

酵母RNA単離リソース

細菌

細菌RNA抽出

細菌サンプルからRNAを抽出することは、複雑な細胞構造を持たないため、培養細胞や組織サンプルと比較して比較的簡単です。細菌サンプルには通常、均一な細胞集団が含まれているため、RNA抽出プロセスを簡素化し、ヘルプピンは RNA組成のばらつきを誘引します。さらに、細菌サンプルでは、汚染されたDNAを除去し、純粋なRNAサンプルを得るための酵素処理などの追加のステップが必要になる場合があります。

酵母サンプルでのRNA単離と同様に、細菌サンプルからRNAを抽出する方法には3つの簡単なステップがあります。1）細菌細胞を回収し、溶解し、酵素消化、機械的破壊、または化学的溶解によりRNAを放出します。2）ライセートを抽出試薬で処理することで細胞成分を可溶化し、RNAを分解から保護します。3）カラムベースの精製またはフェノールクロロホルム抽出でRNAを抽出します。 

選択ガイド：細菌RNA抽出キット

 今すぐ注文今すぐ注文今すぐ注文今すぐ注文
 溶解手順はありません迅速＆簡便なプロトコル、20分迅速で便利なシリカカラムベースのフィルタープレートフォーマットHTP対応、45分
 TRIzol Max細菌RNA単離キット  PureLink RNA MiniキットPureLink Pro 96トータルRNA精製キットMagMAX Total Nucleic Acid Isolation Kit
Top seller ✓  
細胞溶解用の特殊ビーズが付属しています無し無し無しジルコニアビーズ
分離方法高純度有機抽出（アルコール沈殿が必要）迅速簡便なシリカカラム96ウェルフィルタープレートフォーマットの高速で便利なシリカカラム大容量化可能でフレキシブルな磁気ビーズ法
調製時間1時間20分20分45分
開始物質の量最高1x108細胞最高1x109細胞最大1x109細胞最大0.3 gの固体サンプルまたは175 µLの液体サンプル
ハイスループット対応  ✓✓
キット容量100回分50回分96回分100回分

細菌RNA単離リソース

RNAを保護して安全に保つ

RNaseを回避、検出、抑制する方法をご覧ください

Resources
  • Protocol Videos—Videos to help you isolate nucleic acids using a variety of techniques.
  • DNA & RNA Selection Guide—Find the right purification products.
  • Videos—View our library of DNA & RNA purification and analysis videos.
  • Application Notes—Explore our application notes from scientists sharing data for isolation products
Hero banner dark gradient overlay

For Research Use Only. Not for use in diagnostic procedures.

Stylesheet for Classic Wide Template adjustments

For Research Use Only. Not for use in diagnostic procedures.